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Eletroforese nativa clara/azul híbrida para a separação e análise de supercomplexos de cadeia respiratória mitocondrial
JoVE 杂志
生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Hybrid Clear/Blue Native Electrophoresis for the Separation and Analysis of Mitochondrial Respiratory Chain Supercomplexes
DOI:

11:25 min

May 19, 2019

,

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:38Supercomplex Extraction
  • 02:36Gradient Gel Casting and Electrophoresis
  • 06:50In-gel Activity for Complexes I, II, IV and V
  • 08:24Results
  • 10:01Conclusion

Summary

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Aqui apresentamos um protocolo para extrair, resolver e identificar supercomplexos mitocondrial que minimiza a exposição a detergentes e Coomassie Blue. Este protocolo oferece um equilíbrio ideal entre a resolução e a preservação das atividades enzimáticas, minimizando o risco de perda de interações proteína-proteína lábil.

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