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Quantificação de Proteome-largo de rotulagem homogeneidade a nível da molécula
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JoVE 杂志 生物化学
Proteome-wide Quantification of Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level

Quantificação de Proteome-largo de rotulagem homogeneidade a nível da molécula

DOI:
10.3791/59199-v

•

08:29 min

•

April 19, 2019

•

, ,
1Laboratory for Cell Systems Control, RIKEN Center for Biosystems Dynamics Research,RIKEN, 2Laboratoire de Biomatériaux et Bioimagerie,INSERM, 3PRESTO, Japan Science and Technology Agency

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:33Cell Lysis and Fluorescent Labeling
  • 03:26Proteome Separation and Recovery
  • 03:51Microscope Coverslip Preparation
  • 05:46Observation with Single Molecule Fluorescence Microscopy
  • 06:07Results: Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level
  • 07:33Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a homogeneidade de rotulagem para cada espécie de proteína em uma amostra de proteína complexa a nível da molécula.

Tags

Protein QuantificationSingle-molecule AnalysisFluorescent LabelingHeterogeneityMolecular Concentration AssaysDiagnostic MethodsProtein Species AnalysisData ReproducibilityLysing BufferTween-20DTTCHAPSCy3 NHS Ester DyeHEPES-NaOHBiotin-2-amineEDC

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