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Herstellung von Gen-Deletionen in Escherichia coli durch P1 Transduktion mit verbrauchsteuerpflichtigen Antibiotikaresistenz Kassetten
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JoVE 杂志 遗传学
Producing Gene Deletions in Escherichia coli by P1 Transduction with Excisable Antibiotic Resistance Cassettes
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Herstellung von Gen-Deletionen in Escherichia coli durch P1 Transduktion mit verbrauchsteuerpflichtigen Antibiotikaresistenz Kassetten

DOI:
10.3791/58267-v

•

08:13 min

•

September 01, 2018

•

, ,
1Evolution and Genetics, Department of Biosciences,University of Oslo

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:28Phage Lysate Preparation
  • 02:31P1 Transduction
  • 04:30Kanamycin (Kan) Cassette Excision
  • 06:03Results: TAA Expression by a tamA Deletion Strain
  • 07:38Conclusion

Summary

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Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Verwendung von bereits bestehenden antibiotische Resistenz-Kassette Löschung Konstrukte als Grundlage für die Herstellung von Löschung Mutanten in anderen E. Coli -Stämme. Solche Löschung Mutationen können mobilisiert und in den entsprechenden Locus eines Empfängers Stamm mit P1 Bakteriophagen Transduktion eingefügt.

Tags

P1 TransductionGene DeletionEscherichia ColiAntibiotic Resistance CassetteKnockout MutantPhageBacterial CultureLysogeny BrothCentrifugationChloroformSodium Citrate

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