Journal
/
神经科学
/
Um ensaio óptico para vesícula sináptica reciclagem nos neurônios cultivados superexpressão de proteínas pré-sináptica
JoVE 杂志
神经科学
需要订阅 JoVE 才能查看此.  登录或开始免费试用。
JoVE 杂志 神经科学
An Optical Assay for Synaptic Vesicle Recycling in Cultured Neurons Overexpressing Presynaptic Proteins

Um ensaio óptico para vesícula sináptica reciclagem nos neurônios cultivados superexpressão de proteínas pré-sináptica

DOI:
10.3791/58043-v

•

09:33 min

•

June 26, 2018

•

, , ,
1Institute for Anatomy and Embryology,University Medical Centre Göttingen

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:31Transfection
  • 03:52Stimulation and Syt1 Uptake
  • 05:39Immunocytochemistry
  • 07:17Results: GFP-Rogdi at Functional Synapses
  • 08:42Conclusion

Summary

自动翻译

自动翻译

Descrevemos um ensaio óptico para vesícula sináptica (SV) reciclagem em neurônios cultivados. Combinar este protocolo com duplo transfeccao de expressar uma proteína de interesse e o marcador pré-sináptica nos permite localizar sites pré-sináptica, sua vesícula sináptica, capacidade de reciclagem e determinar o papel da proteína de interesse.

Tags

Optical AssaySynaptic Vesicle RecyclingCultured NeuronsPresynaptic ProteinsAntibody SpecificityPrimary Hippocampal CellsTransfectionCalcium ChlorideEndotoxin-free DNATransfection BufferReduced-serum MediumCell-culture MediumIncubationWashingActive Synapses

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

Estudando Pools vesículas Synaptic usando fotoconversão de Corantes Styryl

Recuperação de fluorescência Após Fotodegradação (FRAP) de fluorescência Proteínas Tagged em espinhas dendríticas dos neurônios do hipocampo Cultivadas

Vibrodissociation de neurônios de fatias do cérebro de roedores para estudar a transmissão sináptica e Imagem Terminais pré-sináptica

Análise de Morfologia Spine dendríticas em neurônios cultivados CNS

Análise quantitativa de Reposição da vesícula sináptica Piscina em Cultured neurônios granulares do cerebelo usando Dyes FM

Induzir o crescimento dendrítico no cultivadas neurônios simpáticos

Difusão lateral e Exocitose de proteínas de membrana em neurônios cultivados avaliada através da recuperação de fluorescência e fluorescência perda de fotobranqueamento

Vivo em dois fótons de imagem de experiência dependentes de alterações moleculares em neurônios corticais

Exame do Synaptic Vesicle Reciclagem Usando FM Corantes Durante Evocado, espontânea, e as atividades de Synaptic miniatura

Rotulagem diferencial de superfície celular e internalizado Proteínas após Anticorpo Alimentação da Vivo Cultivadas neurônios

Read Article