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Proteína de captura por afinidade complexos a partir de células de mamíferos Cryomilled
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生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Protein Complex Affinity Capture from Cryomilled Mammalian Cells

Proteína de captura por afinidade complexos a partir de células de mamíferos Cryomilled

DOI:
10.3791/54518-v

•

10:37 min

•

December 09, 2016

•

, ,
1Laboratory of Cellular and Structural Biology,The Rockefeller University, 2Institute for Systems Genetics, Department of Biochemistry and Molecular Pharmacology,New York University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:30Cell Harvesting and Freezing
  • 03:09Cryogenic Disruption of Frozen Cells
  • 04:50Affinity Capture of Protein Complexes from Cell Extracts
  • 06:02Affinity Capture
  • 07:41Results: Comparing Some Different Aspects of Affinity Capture Optimization
  • 09:38Conclusion

Summary

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Aqui descrevemos protocolos para romper as células de mamíferos por moagem em estado sólido a uma temperatura criogénica, produzem um extracto celular a partir do pó de células resultante, e isolar complexos proteína de interesse por captura de afinidade sobre esferas paramagnéticas escala mícron acoplado com anticorpo.

Tags

Protein ComplexAffinity CaptureCryomilledMammalian CellsCell BiologyMolecular BiologyProtein InteractionsPBSCell PelletLiquid NitrogenCell Lysis

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