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Ottimizzato colorazione negativa: un protocollo ad alta velocità per l'esame di piccole e asimmetrica Protein Structure da microscopia elettronica
JoVE 杂志
环境科学
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JoVE 杂志 环境科学
Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy
DOI:

09:37 min

August 15, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:56Preparations
  • 03:42Optimized Negative Staining
  • 06:16EM-Grid Analysis
  • 07:18Examples of Optimized Negative Staining (OpNS)
  • 08:44Conclusion

Summary

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Più della metà delle proteine ​​sono piccole proteine ​​(massa molecolare <200 kDa) che stanno sfidando per entrambi microscopio elettronico di immagini e ricostruzioni tridimensionali. Ottimizzato colorazione negativa è un protocollo robusto e high-throughput per ottenere un elevato contrasto e immagini di piccole proteine ​​o complessi asimmetrici in diverse condizioni fisiologiche relativamente alta risoluzione (~ 1 nm).

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