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Optimierte negative Färbung: ein Hochdurchsatz-Protokoll für die Prüfung kleiner und asymmetrische Proteinstruktur durch Elektronenmikroskopie
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Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy
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Optimierte negative Färbung: ein Hochdurchsatz-Protokoll für die Prüfung kleiner und asymmetrische Proteinstruktur durch Elektronenmikroskopie

DOI:
10.3791/51087-v

•

09:37 min

•

August 15, 2014

•

, ,
1Lawrence Berkeley National Laboratory,The Molecular Foundry

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:56Preparations
  • 03:42Optimized Negative Staining
  • 06:16EM-Grid Analysis
  • 07:18Examples of Optimized Negative Staining (OpNS)
  • 08:44Conclusion

Summary

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Mehr als die Hälfte der Proteine ​​sind kleine Proteine ​​(Molekularmasse <200 kDa), die herausfordernd sind sowohl für Elektronenmikroskop Bildgebung und dreidimensionale Rekonstruktionen. Optimierte negative Färbung ist eine robuste und Hochdurchsatz-Protokoll, um einen hohen Kontrast und eine relativ hohe Auflösung (~ 1 nm) Bilder von kleinen asymmetrische Proteine ​​oder Komplexe unter verschiedenen physiologischen Bedingungen zu erhalten.

Tags

Negative StainingElectron MicroscopyHigh-throughputProtein StructureSmall ProteinsAsymmetric ProteinsCryo-EMLipoproteinRouleauxElectron TomographyCholesteryl Ester Transfer Protein (CETP)

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