Microscopía de fluorescencia es una herramienta analítica muy poderosa que combina las propiedades de aumento de la microscopia ligera con la visualización de la fluorescencia. La fluorescencia es un fenómeno que implica la absorción y la emisión de una pequeña gama de ondas de luz por una molécula fluorescente conocida como un fluoróforo. Microscopía de fluorescencia se logra en conjunto con el microscopio óptico básico mediante la adición de una fuente de luz potente, filtros especializados y un medio de fluorescencia de etiquetado una muestra. Este video describe los principios básicos detrás de microscopía de fluorescencia como el mecanismo de fluorescencia, cambio el Stoke y photobleaching. También da ejemplos de las numerosas formas de fluorescencia una muestra incluyendo el uso de fluorescencia etiquetados anticuerpos y proteínas, ácidos nucleicos tintes fluorescentes con y la adición de proteínas naturalmente fluorescentes a una muestra de la etiqueta. Los principales componentes del microscopio de fluorescencia como una fuente de luz de xenón o mercurio, filtros de luz, espejo dicroico y uso de la persiana para iluminar la muestra están descritos. Por último, se muestran ejemplos de algunas de las muchas aplicaciones para microscopía de fluorescencia.
Procedure
La fluorescencia es un fenómeno que ocurre cuando una sustancia absorbe luz a una determinada longitud de onda y emite luz a otra longitud de onda. La fluorescencia se produce cuando un electrón, que ha sido excitado a un estado de energía más altos y más inestable, se relaja a su estado de tierra y emite un fotón de luz. La luz que se encarga de la excitación, o mover el electrón a un estado de mayor energía, es de menor longitud de onda y mayor energía que la emisión de fluorescencia, que tiene una…