מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות היא כלי אנליטי רב עוצמה המשלב את המאפיינים המגדלים של מיקרוסקופיה קלה עם הדמיה של פלואורסצנטיות. פלואורסצנטיות היא תופעה הכרוכה בספיגה ופליטה של מגוון קטן של אורכי גל אור על ידי מולקולה פלואורסצנטית המכונה פלואורופור. מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות מושגת בשילוב עם מיקרוסקופ האור הבסיסי על ידי הוספת מקור אור רב עוצמה, מסננים מיוחדים ואמצעי לתיוג פלואורסצנטי של מדגם. סרטון זה מתאר את העקרונות הבסיסיים העומדים מאחורי מיקרוסקופיית פלואורסצנטיות, כולל מנגנון הפלואורסצנטיות, השינוי של הסטוק והלבנת תמונות. זה גם נותן דוגמאות של דרכים רבות לתייג פלואורסצנטי מדגם כולל שימוש בנוגדנים וחלבונים מתויגים פלואורסצנטית, צבעי פלואורסצנטי חומצת גרעין עם, ותוספת של חלבונים פלואורסצנטיים טבעיים לדגימה. המרכיבים העיקריים של מיקרוסקופ הפלואורסצנטיות כולל מקור אור קסנון או כספית, מסנני אור, המראה הדיכרואית והשימוש בתריס כדי להאיר את המדגם מתוארים כולם. לבסוף, דוגמאות של כמה יישומים רבים עבור מיקרוסקופיה פלואורסצנטית מוצגים.
Procedure
פלואורסצנטיות היא תופעה המתרחשת כאשר חומר סופג אור אורך גל נתון ולפוט אור אורך גל אחר. פלואורסצנטיות מתרחשת כאלקטרון, שהתרגש ממצב אנרגיה גבוה ולא יציב יותר, נרגע למצב הקרקע שלו ומפרוט פוטון של אור. האור האחראי על עירור, או הזזת האלקטרון למצב אנרגיה גבוה יותר, הוא בעל אורך גל קצר יותר ואנרגיה…