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Un dosaggio quantitativo di insulina che esprimono formante colonia Progenitori
JoVE 杂志
生物学
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JoVE 杂志 生物学
A Quantitative Assay for Insulin-expressing Colony-forming Progenitors
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Un dosaggio quantitativo di insulina che esprimono formante colonia Progenitori

DOI:
10.3791/3148-v

•

14:39 min

•

November 28, 2011

•

, , , , , ,
1Department of Biotechnology & Bioinformatics,California State University Channel Islands, 2Department of Diabetes, Endocrinology and Metabolism,Beckman Research Institute of City of Hope, 3The Irell & Manella Graduate School of Biological Sciences,Beckman Research Institute of City of Hope

Chapters

  • 00:05Title
  • 03:34Generating Conditioned Medium (CM) For the Colony Assay
  • 05:13Obtaining a Single Cell Suspension of Pancreatic-like Progenitors by Fluorescence Activated Cell Sorting
  • 07:55Plating Sorted Cells to Semi-solid Culture
  • 10:49Observing Colony Formation under the Light Microscope
  • 11:47Ngn3-EGFP+ Derived Colonies Express Insulin
  • 13:21Conclusion

Summary

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Un tridimensionale test clonogenica che permette pancreatico-come progenitori di differenziarsi in insulino-colonie che esprimono è descritto. Questo metodo si avvale di semi-solidi supporti contenenti fattori di metilcellulosa, Matrigel e di crescita, in cui progenitori singolo proliferare e differenziarsi<em> In vitro</em>, Permettendo la quantificazione del numero di cellule progenitrici funzionale in una popolazione.

Tags

Quantitative AssayInsulin-expressing Colony-forming ProgenitorsPancreatic Stem CellsProgenitor Cell BiologyIn Vitro AssaySingle Cell AnalysisLineage PotentialPancreatospheresSuspension CultureSingle Cell DepositionCulture MediaNumerationLabor-intensivePancreatosphere-initiating ProgenitorsProliferation And DifferentiationSemi-solid Media Based Colony AssayMethylcelluloseThree-dimensional Space

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