Summary

رسم خرائط الدماغ باستخدام مصفوفة أقطاب الجرافين

Published: October 20, 2023
doi:

Summary

نقدم إجراء رسم خرائط الدماغ القائم على مصفوفة الجرافين لتقليل الغزو وتحسين الدقة الزمانية المكانية. تظهر الأقطاب الكهربائية السطحية القائمة على صفيف الجرافين توافقا حيويا طويل المدى ومرونة ميكانيكية وملاءمة لرسم خرائط الدماغ في الدماغ المعقد. يسمح هذا البروتوكول ببناء أشكال متعددة من الخرائط الحسية في وقت واحد وبالتتابع.

Abstract

تمثل الخرائط القشرية التنظيم المكاني للاستجابات العصبية المعتمدة على الموقع للمنبهات الحسية الحركية في القشرة الدماغية ، مما يتيح التنبؤ بالسلوكيات ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية. تم استخدام طرق مختلفة ، مثل الأقطاب الكهربائية المخترقة ، وتخطيط كهربية الدماغ ، والتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، وتصوير الدماغ المغناطيسي ، والتصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي ، للحصول على خرائط قشرية. ومع ذلك ، فإن هذه الطرق محدودة بسبب ضعف الدقة الزمانية المكانية ، وانخفاض نسبة الإشارة إلى الضوضاء (SNR) ، وارتفاع التكاليف ، وعدم التوافق الحيوي أو التسبب في أضرار مادية للدماغ. تقترح هذه الدراسة طريقة رسم الخرائط الحسية الجسدية القائمة على مصفوفة الجرافين كسمة من سمات تخطيط الكهربية التي توفر توافقا حيويا فائقا ، ودقة زمانية مكانية عالية ، ونسبة إشارة إلى الضوضاء مرغوبة ، وتقليل تلف الأنسجة ، والتغلب على عيوب الطرق السابقة. أظهرت هذه الدراسة جدوى مصفوفة أقطاب الجرافين لرسم الخرائط الحسية الجسدية في الفئران. يمكن تطبيق البروتوكول المقدم ليس فقط على القشرة الحسية الجسدية ولكن أيضا على القشرة الأخرى مثل القشرة السمعية والبصرية والحركية ، مما يوفر تقنية متقدمة للتنفيذ السريري.

Introduction

الخريطة القشرية هي مجموعة من البقع المحلية التي تمثل خصائص الاستجابة للمنبهات الحسية الحركية في القشرة الدماغية. إنها تكوين مكاني للشبكات العصبية وتمكن من التنبؤ بالإدراك والإدراك. لذلك ، تعد الخرائط القشرية مفيدة في تقييم الاستجابات العصبية للمنبهات الخارجية ومعالجة المعلومات الحسيةالحركية 1،2،3،4. تتوفر الطرق الغازية وغير الغازية لرسم الخرائط القشرية. تتضمن إحدى الطرق الغازية الأكثر شيوعا استخدام أقطاب كهربائية داخل القشرة (أو مخترقة) لرسم خرائط5،6،7،8.

واجه تقييم الخرائط القشرية عالية الدقة عند الطلب باستخدام أنقيب كهربائية مخترقة العديد من العقبات. هذه الطريقة شاقة للغاية للحصول على خريطة لائقة وغازية للغاية بحيث لا يمكن تنفيذها للاستخدام السريري ، مما يحظر المزيد من التطوير. اكتسبت التقنيات الحديثة مثل تخطيط كهربية الدماغ (EEG) والتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) وتخطيط الدماغ المغناطيسي (MEG) والتصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي (fMRI) شعبية لأنها أقل توغلا وقابلة للتكرار. ومع ذلك ، نظرا لتكاليفها الباهظة وسوء حلها ، يتم استخدامها في عدد محدود من الحالات9،10،11. في الآونة الأخيرة ، جذبت الأقطاب الكهربائية السطحية المرنة ذات موثوقية الإشارة الفائقة اهتماما كبيرا. تظهر الأقطاب الكهربائية السطحية القائمة على الجرافين التوافق الحيوي والمرونة الميكانيكية على المدى الطويل ، مما يوفر تسجيلات مستقرة في الدماغ المعقد12،13،14،15،16. طورت مجموعتنا مؤخرا مصفوفة متعددة القنوات قائمة على الجرافين للتسجيل عالي الدقة والتحفيز العصبي الخاص بالموقع على السطح القشري. تتيح لنا هذه التقنية تتبع التمثيلات القشرية للمعلومات الحسية لفترة طويلة.

توضح هذه المقالة الخطوات المتبعة في الحصول على خريطة دماغية للقشرة الحسية الجسدية باستخدام مجموعة متعددة الأقطاب من الجرافين مكونة من 30 قناة. لقياس نشاط الدماغ ، يتم وضع مجموعة قطب كهربائي من الجرافين على المنطقة تحت الجافية من القشرة ، في حين يتم تحفيز مقدمة القدم ، والأطراف الأمامية ، ومخلب الخلف ، والطرف الخلفي ، والجذع ، والشعيرات بعصا خشبية. يتم تسجيل الإمكانات الحسية الجسدية (SEPs) للمناطق الحسية الجسدية. يمكن أيضا تطبيق هذا البروتوكول على مناطق الدماغ الأخرى ، مثل القشرة السمعية والبصرية والحركية.

Protocol

تمت الموافقة على جميع إجراءات التعامل مع الحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات بجامعة إنتشون الوطنية (INU-ANIM-2017-08). 1. إعداد الحيوان للجراحة ملاحظة: استخدم Sprague Dawley Rat (8-10 أسابيع) دون التحيز الجنسي لهذه التجربة. تخدير الجرذ ب 90 ?…

Representative Results

يصف هذا البروتوكول كيفية تركيب مصفوفة متعددة القنوات من الجرافين على سطح الدماغ. تم إنشاء الخريطة الحسية الجسدية من خلال اكتساب الاستجابات العصبية للمنبهات الجسدية وحساب سعة الاستجابة. يوضح الشكل 1 مخطط هذه التجربة. يعرض الشكل 2 أ الخصائص ال…

Discussion

يوفر البروتوكول المقدم عملية متعمقة خطوة بخطوة تشرح كيفية الوصول إلى الاستجابات الحسية الجسدية للفئران ورسم خرائطها باستخدام مجموعة أقطاب الجرافين. البيانات المكتسبة من البروتوكول هي SEPs التي توفر معلومات حسية جسدية مرتبطة بشكل متشابك بكل جزء من أجزاء الجسم.

وينبغي النظر …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل جامعة إنتشون الوطنية (التعاونية الدولية) لسونغو يانغ.

Materials

1mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
3mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
Bone rongeur Fine Science Tools 16220-14 remove the skull
connector Gbrain Connect graphene electrode to headstage
drill FALCON tool grind the skull
drill bits Osstem implant grind the skull
Graefe iris forceps slightly curved serrated vubu vudu-02-73010 remove the tissue from the skull or hold wiper
graphene multielectrode array Gbrain records signals from neuron
isoflurane Hana Pharm Corporation sacrifce the subject
ketamine yuhan corporation used for anesthesia
lidocaine(2%) Daihan pharmaceutical  local anesthetic
Matlab R2021b Mathworks Data analysis Software
mosquito hemostats Fine Science Tools 91309-12 fasten the scalp
ointment Alcon prevent eye from drying out 
povidone Green Pharmaceutical corporation disinfect the incision area
RHS 32ch Stim/Record headstage intan technologies M4032 connect connector to interface cable and contain intan RHS stim/amplifier chip
RHS 6-ft (1.8m) Stim SPI interface cable intan technologies M3206 connect graphene electrode to headstage
RHS Stim/Recording controller software intan technologies Data Acquisition Software
RHS stimulation/ Recording controller intan technologies M4200
saline JW Pharmaceutical
scalpel Hammacher HSB 805-03
stereotaxic instrument stoelting fasten the subject
sterile Hypodermic Needle KOREAVACCINE CORPORATION remove the dura mater
Steven Iris Tissue Forceps KASCO 50-2026 remove the dura mater
surgical blade no.11 FEATHER inscise the scalp
surgical sicssors Fine Science Tools 14090-09 inscise the scalp and remove the dura mater
wooden stick whisker stimulation
xylazine Bayer Korea used for anesthesia

References

  1. Leergaard, T. B., et al. Rat somatosensory cerebropontocerebellar pathways: spatial relationships of the somatotopic map of the primary somatosensory cortex are preserved in a three-dimensional clustered pontine map. Journal of Comparative Neurology. 422 (2), 246-266 (2000).
  2. Craner, S. L., Ray, R. H. Somatosensory cortex of the neonatal pig: I. Topographic organization of the primary somatosensory cortex (SI). Journal of Comparative Neurology. 306 (1), 24-38 (1991).
  3. Benison, A. M., Rector, D. M., Barth, D. S. Hemispheric mapping of secondary somatosensory cortex in the rat. Journal of Neurophysiology. 97 (1), 200-207 (2007).
  4. Lee, M., et al. Graphene-electrode array for brain map remodeling of the cortical surface. NPG Asia Materials. 13 (1), (2021).
  5. Yang, S. C., Weiner, B. D., Zhang, L. S., Cho, S. J., Bao, S. W. Homeostatic plasticity drives tinnitus perception in an animal model. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (36), 14974-14979 (2011).
  6. Yang, S., Zhang, L. S., Gibboni, R., Weiner, B., Bao, S. W. Impaired development and competitive refinement of the cortical frequency map in tumor necrosis factor-alpha-deficient mice. Cerebral Cortex. 24 (7), 1956-1965 (2014).
  7. Miyakawa, A., et al. Tinnitus correlates with downregulation of cortical glutamate decarboxylase 65 expression but not auditory cortical map reorganization. Journal of Neuroscience. 39 (50), 9989-10001 (2019).
  8. Yang, S., Su, W., Bao, S. Long-term, but not transient, threshold shifts alter the morphology and increase the excitability of cortical pyramidal neurons. Journal of Neurophysiology. 108 (6), 1567-1574 (2012).
  9. Beniczky, S., Schomer, D. L. Electroencephalography: basic biophysical and technological aspects important for clinical applications. Epileptic Disorders. 22 (6), 697-715 (2020).
  10. Kim, S. G., Richter, W., Uğurbil, K. Limitations of temporal resolution in functional MRI. Magnetic Resonance Medicine. 37 (4), 631-636 (1997).
  11. Cho, Z. H., et al. A fusion PET-MRI system with a high-resolution research tomograph-PET and ultra-high field 7.0 T-MRI for the molecular-genetic imaging of the brain. Proteomics. 8 (6), 1302-1323 (2008).
  12. Viventi, J., et al. Flexible, foldable, actively multiplexed, high-density electrode array for mapping brain activity in vivo. Nature Neuroscience. 14 (12), 1599-1605 (2011).
  13. Masvidal-Codina, E., et al. High-resolution mapping of infraslow cortical brain activity enabled by graphene microtransistors. Nature Materials. 18 (3), 280-288 (2019).
  14. Blaschke, B. M., et al. Mapping brain activity with flexible graphene micro-transistors. 2D Materials. 4 (2), 025040 (2017).
  15. Park, S. W., et al. Epidural electrotherapy for epilepsy. Small. 14 (30), 1801732 (2018).
  16. Lim, J., et al. Hybrid graphene electrode for the diagnosis and treatment of epilepsy in free-moving animal models. NPG Asia Materials. 15 (1), 7 (2023).
  17. Hermanns, H., et al. Molecular mechanisms of action of systemic lidocaine in acute and chronic pain: a narrative review. British Journal of Anaesthesia. 123 (3), 335-349 (2019).
  18. Tchoe, Y., et al. Human brain mapping with multithousand-channel PtNRGrids resolves spatiotemporal dynamics. Science Translational Medicine. 14 (628), (2022).
  19. Wilent, W. B., Contreras, D. Dynamics of excitation and inhibition underlying stimulus selectivity in rat somatosensory cortex. Nature Neuroscience. 8 (10), 1364-1370 (2005).
  20. Insanally, M. N., Köver, H., Kim, H., Bao, S. Feature-dependent sensitive periods in the development of complex sound representation. Journal of Neuroscience. 29 (17), 5456-5462 (2009).

Play Video

Cite This Article
Kim, D., Jeong, M., Kim, E., Kim, G., Na, J., Yang, S. Brain Mapping Using a Graphene Electrode Array. J. Vis. Exp. (200), e64910, doi:10.3791/64910 (2023).

View Video