Denna studie rapporterar blodprovstagning från svans ven i möss med en vakuum extraktion rörledningssystemet med monokel förstoringsglas. Vår metod är lätt att öva och kunde användas för upprepade blodprov hos möss.
Blod provtagning är grunden för experimentell forskning på djur. Det är viktigt att erhålla adekvat blodprov för olika forskningsändamål. Svans venerna i möss är små, och det är ibland svårt att få krävs blodvolymen genom konventionella punktering metoder. Denna studie undersöker överlägsenhet av upprepade blod provsamling från svans venerna i möss genom användning av ett vakuum blod insamling systemet och glasögon förstoringsglas (experimentgruppen) jämfört med konventionella blodprovstagning metoder (konventionella gruppen) , utförs av nybörjare och experter, respektive. Med hjälp av en monokel förstoringsglas infogas en fjäril nålspetsen i svansen venen i varje mus i den experimentella gruppen. När venen blir penetrerad framgångsrikt, samlas ett blodprov i vakuum samling röret genom införande av gummi slutet av en fjärilsnål i det vakuum bloduppsamlingsrör. Kolven används sedan för att samla blod utan hjälp av glasögon förstoringsglaset i gruppen konventionella. Andelen framgångsrika för blod provtagning av nybörjare och experter visade sig vara 70% vs. 100% (p < 0,01) i experimentgruppen och 35% jämfört med 85% (p < 0,01) i gruppen konventionella. För både nybörjare och experter var punktering gånger krävs för att få krävs blodprov betydligt lägre i den experimentella gruppen jämfört med konventionella gruppen (2.40 ± 0,75 vs. 2.90 ± 0,31, p < 0,05; 1,15 ± 0,37 vs. 1,55 ± 0,76, p < 0,05). Avslutningsvis presenteras blod provtagning tekniken är genomförbart och lätt att träna och gör frekvent provtagning av adekvat blod volymer från icke-sövd möss.
Blodprovstagning från djur som är inblandade i experiment är en grundläggande forskning teknik. Det finns några tillgängliga metoder för blodinsamling av från möss, inklusive svans snips och punktera av hjärtat, retro-orbital plexus, halsvenen, caudal ven och vena cava. Helst bör blod samlas i ett minimalt invasivt sätt, med minimal inverkan på djurens hälsa. Men de vanligaste teknikerna ofta orsaka stress på djur och kan påverka forskning resultat1. Blodinsamling från retro-orbital plexus kan användas för att erhålla tillräckligt blodvolym från möss2. Men, det kan resultera i svår vävnadsskada och tillåter inte för att få blodet upprepade gånger i kort tid intervall3.
Den kaudala ven är en överlägsen plats för blodinsamling av, som orsakar minimal skada på möss. Dock svans venerna i möss är tunna, och det är ibland svårt att få tillräckligt med blod genom konventionella punktering teknik. I vissa fall krävs upprepade punkteringar för att få önskad blodvolym. Anestesi är också allmänt rekommenderas att underlätta blodprovstagning från svans venerna i möss. Dessutom kan en skalpell, rak kant rakblad eller vass sax behövas ta bort ändarna på svansar att erhålla den nödvändiga blod prov4. Vi har tidigare rapporterat framgångsrika blodinsamling från svans venerna i icke-nedsövd råttor i det vakuum blod prov insamlingssystemet, vilket minskade risken för blod föroreningar och undvika behovet av upprepade punkteringar5. Denna studie rapporterar liknande blod insamling metoder i icke-sövd möss.
Föreliggande studie beskriver en lätt att lära blod insamlingsmetod hos möss som är överlägsen konventionella tekniker. Första kan metoden bemästras enkelt med en hög framgång. För det andra, det är baserat på principen om vakuum undertryck och möjliggör kontinuerlig ritning av blod med minskad risk för direkt blodexponering, vilket också minskar risken för kontaminering och hemolys9. För det tredje, denna metod är genomförbart för frekvent provtagning av blod med tillräckliga volymer från möss under en kort tidsperiod för olika forskningsändamål. Dessutom förfarandet tillfogar endast minimal skada på möss, och blodinsamling kan utföras utan användning av bedövningsmedel; Således, påverkan av stress respons och bedövningsmedel på blodprov kan undvikas.
Svans venen är en överlägsen plats för blodprovstagning enligt godkända protokoll7. Dock är det inte alltid lätt att få tillräcklig blodvolym från tunn svans vener med låga flöden. I detta fall, huden är vanligtvis uppskuren och ven blir penetrerad av en lansett, eller slutet av svansen avlägsnas snabbt genom en rakhyvel.
Detta protokoll syftar till att förbättra metodiken för blodinsamling från möss använder vakuum blod insamlingssystemet, som kräver en vakuum bloduppsamlingsrör för prov och fjärilsnål monokeln förstoringsglas. Detta vakuum blod provtagningssystem som vanligtvis används för insamling av blodprov från patienter i daglig klinisk praxis10. Med hjälp av en monokel förstoringsglas är den perfekta punktering en svans ven lättare att hitta. När spetsen av en nål sätts in i svansen venen, kommer automatiskt blodflödet i vakuum röret på grund av undertryck. Efter drar nålen från svans venen, kommer som blockeras i katetern blodflödet till samlande vakuumrör på grund av vakuum.
Följande tips är viktiga för framgångsrik tillämpning av metoden. Först varje mus kroppsvikt bör vara 40 g eller högre för att minska svårigheten i punktera och få tillräckligt med blod. Andra, när det gäller misslyckade blodinsamling, praktiker bör försök att dra ut injektionsnålen långsamt tills blodet fortsätter att strömma ut. För det tredje är det nödvändigt att förlänga svansen för att undvika någon rörelse vid blodprovstagning. Hålla nålen försiktigt kan hjälpa till att hålla kanylspetsen i venen så musen svans flyttas. Om blodet slutar flöda ut under blodinsamling, fjärde justeras nål vinkeln i tid. För att undvika koagulation i nålen, en annan punktering position bör väljas om blodet slutar flöda ut efter 15 s. Slutligen rekommenderas i samarbete med två operatörer medan du använder denna teknik för att samla blod från möss.
Kort sagt, är metoden antagna vakuum blod insamling för användning i möss säker, genomförbart och lätt att träna. Denna metod gör frekvent provtagning av blod med tillräcklig blod volymer från icke-sövd möss.
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete fick stöd av naturen Science Foundation beviljandet av Hubei-provinsen, Kina [Grant No. 2018CFB761].
Double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 20163151718 | 22G (0.7 mm x 25 mm) |
Eyeglass magnifier | Vergroberung | 1.5x | |
Normal salt diet for mice | Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study. | ||
Plastic holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 35-45 g rat hoder | |
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. | |
Syringe | Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China | 20160911A | 1 mL (Matching needle size: 0.45×16RW LB) |
Vacuum blood collection system | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 20171222 | 1 mL (Φ12.4×L75) |