진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된
Summary
이 연구 보고 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 쥐에서 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링 합니다. 우리의 방법은 연습을 쉽게 이며 쥐에 반복 혈액 샘플링에 사용 될 수 있었다.
Abstract
혈액 샘플 컬렉션은 실험 동물 연구의 기초입니다. 그것은 다양 한 연구 목적에 대 한 적절 한 혈액 샘플을 얻기 위해 중요 합니다. 쥐의 꼬리 정 맥은 작은, 그리고 그것이 때로는 기존의 펑크 메서드에서 필요한 혈액 볼륨을 얻기 어렵다. 이 연구 조사는 진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기 (실험 그룹) 기존의 혈액 샘플링 방법 (기존의 그룹)에 비해의 사용을 통해 쥐의 꼬리 정 맥에서 반복 된 혈액 샘플 컬렉션의 우수성 각각 초보자와 전문가 의해 수행. 안경 돋보기의 도움으로, 나비 바늘 팁 실험적인 그룹에 있는 각 마우스의 꼬리 정 맥에 삽입 됩니다. 정 맥은 성공적으로 침투 하 고 때 혈액 샘플은 진공 혈액 컬렉션 튜브에 나비 바늘의 고무 끝의 삽입에 의해 진공 컬렉션 튜브에 수집 됩니다. 플런저 다음 기존의 그룹에 안경 돋보기의 도움 없이 혈액을 수집 하는 데 사용 됩니다. 초보자와 전문가 의해 혈액 샘플 컬렉션의 성공률 100% (p < 0.01) 대 70% 실험 그룹과 기존 그룹에서 85% (p < 0.01) 35%에서 보였다. 초보자와 전문가 모두에 대 한 펑크 시간 필요한 혈액 샘플을 얻기 위해 필요한 실험 그룹 (2.40 ± 0.75 2.90 ± 0.31 대, p < 0.05; 1.15 ± 0.37 1.55 ± 0.76, p < 0.05 대) 전통적인 그룹에 비해 훨씬 낮은 했다. 결론적으로, 제시 혈액 샘플링 기법 가능 하 고 연습을 쉽게 이며 비 취 쥐에서 적절 한 혈액 볼륨의 자주 샘플링을 가능 하 게.
Introduction
동물 실험에 관련 된에서 혈액 샘플링 기초 연구 기술입니다. 사용할 수 있는 몇 가지 기술이 있다 쥐에서 혈, 꼬리 자르는 등 및 심장, 역 궤도 총, 경 정 맥, 꼬리 정 맥, 그리고 베 나 정 맥의 puncturing. 이상적으로, 혈액 동물의 건강에 미치는 영향을 최소화와 최소 침 습 방식으로 수집 한다. 그러나, 가장 일반적으로 사용 되는 기술을 종종 동물에 스트레스를가 하 고 연구 결과1에 영향을 줄 수 있습니다. 복고풍 궤도 총에서 혈 쥐2에서 충분 한 혈액 량을 얻기 위해 사용할 수 있습니다. 그러나, 그것은 심각한 조직 손상 될 수 있습니다 하 고 짧은 시간 간격3에서 반복 해 서 혈액을 얻기 위해 허용 하지 않습니다.
꼬리 정 맥 행 쥐 시 최소한의 부상 혈액 컬렉션에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 쥐의 꼬리 정 맥은 얇은, 그리고 그것이 때로는 기존의 펑크 기술을 통해 충분 한 혈액을 얻기 어렵다. 경우에 따라 반복된 자국 원하는 혈액 볼륨을 얻기 위해 필요 합니다. 마 취는 또한 일반적으로 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링을 촉진 하기 위하여 권장 됩니다. 또한, 메스, 똑 바른 가장자리 면도기, 또는 날카로운가 위 필요한 혈액 샘플4를 꼬리의 끝을 제거 하려면 필요할 수 있습니다. 우리 혈액 오염의 위험을 감소 하 고 반복된 구멍5에 대 한 필요성을 피할 수 있는 진공 혈액 샘플 수집 시스템에 의해 이전 비 anaesthetized 쥐의 꼬리 정 맥에서 성공적인 혈액 컬렉션을 보고 있다. 이 연구는 비 취 쥐에 있는 유사한 혈액 수집 방법을 보고합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
현재 연구는 배우기 쉬운 혈액 수집 방법을 마우스에서 기존의 기술에 우수 하는 설명 합니다. 첫째, 메서드 높은 성공율 쉽게 장악 될 수 있습니다. 둘째, 그것 진공 부정 압력 원리에 기반 하 고 또한 오염 및 용 혈9의 기회를 감소 시키는 직접 혈액 노출의 위험을 감소와 혈액의 연속 그림에 대 한 있습니다. 셋째,이 메서드는 다양 한 연구 목적을 위해 짧은 기간 동안 쥐에서 적절 한 볼륨으로 혈액의 자주 샘플링 가능. 또한, 절차 inflicts 마우스에만 최소한의 부상 그리고 혈액 컬렉션; 마 취약의 사용 없이 실행 될 수 있습니다. 따라서, 혈액 샘플에는 스트레스 반응 및 마 취약의 영향을 피할 수 있습니다.
꼬리 정 맥에 따라 승인 된 프로토콜7혈액 샘플링에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 그것은 항상 쉽지 않다를 낮은 혈액 흐름으로 얇은 꼬리 정 맥에서 충분 한 혈액 볼륨. 이 경우에, 피부는 일반적으로 자르면 정 맥, 랜 싯에 의해 침투 또는 꼬리의 끝에 면도칼으로 신속 하 게 제거 됩니다.
이 프로토콜 진공 혈액 샘플 컬렉션 튜브, 나비 바늘, 그리고 안경 돋보기를 필요로 하는 진공 혈액 수집 시스템을 사용 하 여 쥐에서 혈액 컬렉션의 방법론을 개선 하는 것을 목표로. 이 진공 혈액 샘플링 시스템으로 매일 임상 연습10환자에서 혈액 샘플을 수집 하기 위해 사용 됩니다. 안경 돋보기의 도움으로 꼬리 정 맥의 완벽 한 펑크 포인트 찾을 수 쉽습니다. 바늘의 팁을 꼬리 정 맥에 삽입 하는 경우 혈액 부정적인 압력 진공 튜브로 자동으로 흐르게 됩니다. 바늘을 꼬리 정 맥에서 철수, 후 카 테 터에서 차단 된 혈액 수집 진공 튜브 진공 때문에 흐름 것입니다.
다음 팁은 방법의 성공적인 응용 프로그램에 대 한 중요 합니다. 첫째, 각 마우스의 몸 무게 40 g 해야 이상 감소 puncturing에 충분 한 혈액을 얻기 어려움. 둘째, 실패 한 혈의 경험 혈액을 밖으로 계속 될 때까지 천천히 바늘을 철회 하려고 한다. 셋째, 혈액 샘플링 하는 동안 어떤 움직임을 피하기 위해 꼬리를 확장 하는 생명 이다. 바늘을 부드럽게 잡고 마우스 꼬리 움직임으로 정 맥에 바늘 팁을 유지 시킬 수 있습니다. 넷째, 혈액 혈액 수집 하는 동안 밖으로 흐르는 중지, 바늘 각도 적시에 조정 되어야 한다. 바늘에 혈액 응고를 방지 하기 위해 다른 빵 꾸 위치를 선택 해야 합니다 15 후 밖으로 흐르는 혈액 중지 하는 경우 s. 마지막으로,이 기법을 사용 하 여 쥐에서 혈액을 수집 하는 동안 두 사업자의 협력을 권장 합니다.
즉, 마우스에 사용 하기 위해 채택 된 진공 혈액 수집 방법, 가능 하 고, 안전 하 고 쉽게 연습입니다. 이 메서드는 적절 한 혈액 볼륨 비 취 쥐에서 혈액의 자주 샘플링을 수 있습니다.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 지원 [보조금 번호 2018CFB761] 후베이 성, 중국의 자연 과학 재단 부여에 의해.
Materials
| Double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 20163151718 | 22G (0.7 mm x 25 mm) |
| Eyeglass magnifier | Vergroberung | 1.5x | |
| Normal salt diet for mice | Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study. | ||
| Plastic holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 35-45 g rat hoder | |
| SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. | |
| Syringe | Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China | 20160911A | 1 mL (Matching needle size: 0.45×16RW LB) |
| Vacuum blood collection system | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 20171222 | 1 mL (Φ12.4×L75) |
References
- Grouzmann, E., et al. Blood sampling methodology is crucial for precise measurement of plasma catecholamines concentrations in mice. European Journal of Physiology. 447 (2), 254-258 (2003).
- Heimann, M., Roth, D. R., Ledieu, D., Pfister, R., Classen, W. Sublingual and submandibular blood collection in mice: a comparison of effects on body weight, food consumption and tissue damage. Lab Animal. 44 (4), 352-358 (2010).
- Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage. Lab Animal. 43 (3), 255-260 (2009).
- Hoff, J. Methods of blood collection in the mouse. Lab Animal. 29 (10), 47-53 (2000).
- Zou, W., et al. Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System. Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).
- Kilkenny, C., Altman, D. G. Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution. Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).
- Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).
- Diehl, K. H., et al. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).
- Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter. Academic Emergency Medicine. 20 (11), 1151-1155 (2013).
- Eder, J. M., Cutter, G. R. A new device for collecting cord blood. Obstetrics and Gynecology. 86 (5), 850-852 (1995).
