Denne undersøgelse rapporter udtagning af blodprøve fra hale vene i mus ved hjælp af et vakuum rør-udsugning med monokel Forstørrelsesglas. Vores metode er nem at praksis og kunne bruges til gentagne blod prøveudtagning i mus.
Blod prøve samling er grundlaget for eksperimenterende dyreforsøg. Det er vigtigt at få tilstrækkelig blodprøver for forskellige forskningsformål. Hale årerne af mus er små, og det er undertiden vanskeligt at opnå den krævede blodvolumen af konventionelle punktering metoder. Dette studie undersøger overlegenhed af gentagne blod prøve samling fra hale vener af mus gennem brug af et vakuum blod samling system og monokel Forstørrelsesglas (eksperimentelle gruppe) i forhold til konventionelle blod prøveudtagningsmetoder (konventionelle gruppe) , udført af begyndere og eksperter, henholdsvis. Med hjælp fra en monokel Forstørrelsesglas indsættes en sommerfugl nål tip i halen vene af hver mus i den eksperimentelle gruppe. Når venen gennemtrænges med succes, er en blodprøve indsamlet i vakuum collection tube ved indsættelse af gummi slutningen af en sommerfugl nål i vakuum blod collection tube. Stemplet bruges derefter til at indsamle blod uden hjælp fra monokel Forstørrelsesglas i den konventionelle gruppe. Succesrate af blod prøve samling af begyndere og eksperter blev vist sig at være 70% vs 100% (p < 0,01) i den eksperimentelle gruppe og 35% vs. 85% (p < 0,01) i den konventionelle gruppe. For både begyndere og eksperter var punktering gange kræves for at opnå kræves blodprøven signifikant lavere i gruppen eksperimenterende i forhold til den konventionelle gruppe (2,40 ± 0,75 vs 2,90 ± 0.31, p < 0,05, 1,15 ± 0,37 vs 1.55 ± 0,76, p < 0,05). Sammenfattende præsenteres blod prøveudtagning teknik er muligt og let at praksis og giver mulighed for hyppige prøveudtagning af tilstrækkelige blod diskenheder fra ikke-bedøvede mus.
Udtagning af blodprøve fra dyr, der er involveret i forsøg er en teknik, grundlæggende forskning. Der er nogle tilgængelige teknikker til indsamling af blod fra mus, herunder hale klip og punktering af hjertet, retro-orbital plexus, halsfedt, caudale vene og vena cava. Ideelt set bør blod indsamles i en minimalt invasiv måde og med minimal indvirkning på dyrets sundhed. Men de mest almindeligt anvendte teknikker ofte påføre stress på dyr og kan påvirke forsknings resultater1. Indsamling fra retro-orbital plexus kan bruges til at få nok blodvolumen fra mus2. Men det kan resultere i alvorlige vævsskader og giver ikke mulighed for at få blod gentagne gange i kort tid mellemrum3.
Den caudale vene er en overlegen placering for blod samling, som påfører minimal skade på mus. Men hale årerne af mus er tynde, og det er undertiden vanskeligt at få nok blod gennem konventionelle punktering teknik. I nogle tilfælde kan er gentagne punkteringer forpligtet til at opnå den ønskede blodvolumen. Anæstesi er også almindeligt anbefalede at lette udtagning af blodprøve fra hale venerne i mus. Desuden kan en skalpel, straight edge barberblade eller skarpe sakse være nødvendigt at fjerne enderne af haler at opnå den krævede blod prøver4. Vi har tidligere rapporteret succesfuld blod samling fra hale årerne af ikke-bedøvet rotter af vakuum blod prøve indsamlingssystem, som reduceret risiko for kontaminering, blod og undgå behovet for gentagne punkteringer5. Denne undersøgelse rapporter en lignende blod samling metode i ikke-bedøvede mus.
Den nuværende undersøgelse beskriver en nem-at-lære blod samling metode i mus, som er overlegen i forhold til de konventionelle teknikker. Først, kan metoden styres nemt med en høj succesrate. For det andet, det er baseret på princippet om vakuum undertryk og giver mulighed for kontinuerlig tegning af blod med en reduceret risiko for direkte blod eksponering, hvilket også reducerer risikoen for forurening og hæmolyse9. For det tredje, denne metode er muligt for hyppige prøveudtagning af blod med tilstrækkelige mængder fra mus over en kort periode for forskellige forskningsformål. Desuden proceduren påfører kun minimal skade på mus, og blodet samling kan udføres uden brug af anæstetika; således kan påvirkning af stressrespons og anæstesiologi blodprøver undgås.
Hale vene er en overlegen placering for udtagning af blodprøve efter den godkendte protokol7. Men det er ikke altid let at opnå tilstrækkelig blodvolumen fra tynde hale vener med lavt blodet flyder. I dette tilfælde, huden er som regel skåret åben og vene gennemtrænges af en lancet, eller slutningen af halen er fjernet hurtigt af en barberkniv.
Denne protokol har til formål at forbedre metoden i blod samling fra mus ved hjælp af vakuum blod samling system, som kræver en vakuum blod prøve collection tube, sommerfugl nål og monokel Forstørrelsesglas. Dette vakuum blod prøveudtagningssystemet er normalt bruges til indsamling af blodprøver fra patienter i daglig klinisk praksis10. Med hjælp fra en monokel Forstørrelsesglas er det perfekte punktering punkt af en hale vene nemmere at finde. Når spidsen af en nål indsættes i halen blodåre, vil blodet automatisk strømme ind vakuum rør på grund af undertryk. Efter hæve nålen fra hale blodåre, vil blodet, der er blokeret i kateteret strømme ind den indsamling vakuum rør på grund af vakuum.
De følgende tips er vigtige for vellykket anvendelse af metoden. Først, kropsvægt hver mus bør være 40 g eller højere for at formindske svært ved punktering og får nok blod. For det andet for mislykkede blod samling, bør eksperimentatorer forsøge at hæve nålen langsomt indtil blod fortsætter med at strømme ud. For det tredje er det afgørende at udvide halen for at undgå enhver bevægelse under udtagning af blodprøve. Holder nål forsigtigt kan bidrage til at holde nålen tip i venen som musen hale bevæger sig. For det fjerde, hvis blod standser flyder ud under indsamling, kanylen vinkel bør justeres i tide. For at undgå blodets koagulation i nålen, en anden punktering position skal vælges, hvis blod standser flyder ud efter 15 s. Endelig anbefales i samarbejde med to operatører, mens du bruger denne teknik til at indsamle blod fra mus.
Kort sagt, er den vedtagne vakuum blod samling metode til brug ved mus sikker, muligt og let at praksis. Denne metode gør det muligt for hyppige prøveudtagning af blod med tilstrækkelige blod diskenheder fra ikke-bedøvede mus.
The authors have nothing to disclose.
Dette arbejde blev støttet af Nature Science Foundation grant i Hubei-provinsen, Kina [Grant No. 2018CFB761].
Double-pointed needle | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 20163151718 | 22G (0.7 mm x 25 mm) |
Eyeglass magnifier | Vergroberung | 1.5x | |
Normal salt diet for mice | Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study. | ||
Plastic holder | Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China | 35-45 g rat hoder | |
SPSS software for statistical analysis | SPSS Inc, Chicago; USA | Version 17.0. | |
Syringe | Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China | 20160911A | 1 mL (Matching needle size: 0.45×16RW LB) |
Vacuum blood collection system | Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China | 20171222 | 1 mL (Φ12.4×L75) |