犁鼻器(VNO)检测种内的化学信号,传达社会和生殖信息。我们已经进行钙离子成像实验,利用转基因小鼠犁鼻组织中表达的G – CaMP2。这种方法可以让我们来分析复杂的犁鼻器神经元的反应模式,以大量的信息素的刺激。
犁鼻器(VNO)检测,化学感应信号在同一物种的1,2个人的社会,性和生殖状态信息。这些种内的信号,信息素,以及来自一些食肉动物3的信号,激活高水平的特异性和灵敏度 4犁鼻感觉神经元(VSNS) 。 G蛋白偶联受体V1R,V2R和FPR 5-14,至少有三个不同的家庭表示在犁鼻神经元的调解检测的化学感应线索。为了了解信息素的信息是如何编码的VNO,它是分析个人VSNS响应各种刺激,并确定这些反应的特异性受体介导的关键。
VNO neuroepithelia括在一对犁骨头。 VNO半盲管状结构有一个开口端(犁鼻管)连接到鼻腔。 VSNS延长树突的犁鼻器信息素线索接触表达的受体在树突状旋钮管腔部分。 VSNS的细胞体的形式与V1R和V2R伪分层表示层分别6-8在根尖和基底层。几项技术已被用于监察VSNS 4,12,15-19感官刺激的反应。急性切片准备在这些技术中,有几个优点。首先,3,17分离VSNS相比,切片的筹备工作保持在其原生形态和细胞树突的神经元保持相对完好。二,VSNS胞体很容易在冠状片的VNO访问,允许电生理研究和成像实验相比,整个上皮细胞和整个安装准备工作 12,20 。第三,这种方法可以结合分子克隆技术,让受体识别。
感官刺激会引起强烈的Ca 2 + VSNS涌入,表明受体激活 4,21 。因此,我们开发的转基因小鼠的嗅感觉神经元,其中包括VSNS 15,22表达的G – CaMP2。探针的灵敏度和遗传性,极大地促进钙离子成像实验。这种方法消除了染料4,21以前的研究中使用的加载过程。我们还采用了配体传递系统,可应用各种刺激的VNO片。这两种技术的结合使我们能够监测多个神经元,同时响应大量的刺激。最后,我们已经建立了一个半自动化分析的管道,以协助图像处理。
大多数的犁鼻器受体(VRS)保持作为,因为他们发现由杜拉克和Axel 5的孤儿受体。这些化学感应受体和他们在调解动物行为中的作用的信息素配体不能很好地理解。到现在为止,只有一对配体/受体,ESP1肽及其受体,Vmn2r116(V2Rp5),已确定并传达特定的社会信息,19,23。另一个受体,V1rb2,已被证明回应2 -庚酮,这大概是从雌性小鼠24尿液丰富。然而,此配体所传达的具体?…
The authors have nothing to disclose.
我们感谢安德烈莫兰连同实验动物服务设施(LASF)的成员,他们对畜牧业和技术服务的优秀支持在斯托瓦斯研究所。这项工作是支持,从斯托瓦斯研究所和国立卫生研究院(NIDCD 008003)资金,哭了。内容完全是作者的责任,并不一定代表美国国立耳聋与其他交流障碍研究所或国立卫生研究院的官方意见。美国正在申请专利的斯托瓦斯研究所,哭和LM的tetO – G CaMP2小鼠。