Deze video beschrijft een zachte agar kolonievormingstest om de effecten van een PADI-enzymremmer en BB-Cl-amidine op borstkankertumorigeniciteit in vitrote testen. Deze test maakt ook de kwantitatieve beoordeling van het celtransformatiepotentieel in de context van genetische verstoringen mogelijk.
Protocol
1. Bereiding van 3% 2-Hydroxyethyl Agarose Voeg in een schone, droge glazen fles van 100 ml 0,9 g 2-hydroxyethylagarose (Agarose VII) toe, gevolgd door 30 ml gedestilleerd water. Magnetron het mengsel gedurende 15 sec en wervel voorzichtig. Herhaal deze stap nog minstens drie keer totdat het agarosepoeder volledig is opgelost. Autoclaaf de oplossingsbevattende fles gedurende 15 minuten. Laat de agarose-oplossing afkoelen tot RT voor verder gebruik. Bewaar de oplossing bij RT. …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
Zeiss Axiopot
Carl Zeiss Microscopy
1021859251
Inverted Microscope
Olympus
CKX41
DMEM/F-12
Lonza BioWhittaker
12-719F
HyClone Donor Equine Serum
Fisher Scientific
SH30074.03
Penicillin Streptomycin
Life Technologies
15140-122
2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).