Ensayo de formación de colonias de agar blando: un método para probar los efectos de los nuevos compuestos sobre la proliferación de células cancerosas
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Horibata A. et. al., Utilización del ensayo de formación de colonias de agar blando para identificar inhibidores de la tumorigenicidad en las células del cáncer de mama. J. Vis. Exp. (2015).
Este video describe un ensayo de formación de colonias de agar suave para probar los efectos de un inhibidor de la enzima PADI y BB-Cl-amidine en la tumorigenicidad del cáncer de mama in vitro. Este ensayo también permite la evaluación cuantitativa del potencial de transformación celular en el contexto de perturbaciones genéticas.
Protocol
1. Preparación del 3% 2-Hidroxietil Agarose En una botella de vidrio limpia y seca de 100 ml, agregue 0,9 g de agarose de 2 hidroxietil (Agarose VII), seguida de 30 ml de agua destilada. Microondas la mezcla durante 15 s y remolino suavemente. Repita este paso al menos tres veces más hasta que el polvo de agarose se disuelva por completo. Autoclave el frasco que contiene la solución durante 15 min. Permita que la solución de agarose se enfríe a RT antes de su uso posterior. Al…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Cite This Article
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).