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Estrazione di microtubuli modificati da cellule di mammifero per studiare complessi microtubulo-proteine mediante microscopia crioelettronica
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March 03, 2023
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Qui, descriviamo un protocollo per estrarre la tubulina endogena da cellule di mammifero, che possono mancare o contenere specifici enzimi modificanti i microtubuli, per ottenere microtubuli arricchiti per una specifica modifica. Descriviamo quindi come i microtubuli estratti possono essere decorati con proteine purificate che legano i microtubuli per preparare griglie per la microscopia crioelettronica.
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Bak, J., Landskron, L., Brummelkamp, T. R., Perrakis, A. Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy. J. Vis. Exp. (193), e65126, doi:10.3791/65126 (2023).
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