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Purificação e Controle de Qualidade de Complexos de Septina Recombinante para Reconstituição Livre de Células
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Purification and Quality Control of Recombinant Septin Complexes for Cell-Free Reconstitution

Purificação e Controle de Qualidade de Complexos de Septina Recombinante para Reconstituição Livre de Células

português

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11:50 min

•

June 23, 2022

DOI:

10.3791/63871-v

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10.3791/63871-v

•

11:50 min
June 23, 2022

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1Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology, 2Institut Fresnel, CNRS UMR7249,Aix Marseille Univ, Centrale Marseille, 3Institut Curie, Université PSL,Sorbonne Université

Summary

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A reconstituição in vitro de proteínas citoesqueléticas é uma ferramenta vital para entender as propriedades funcionais básicas dessas proteínas. O presente trabalho descreve um protocolo para purificar e avaliar a qualidade de complexos de septina recombinante, que desempenham um papel central na divisão e migração celular.

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Recombinant Septin ComplexesCell-free ReconstitutionPurificationQuality ControlAffinity ChromatographyHis-tagged SeptinsStrep-II Tagged ProteinsFPLCBacterial ExpressionIPTG InductionCell LysisSonicationCentrifugationOptical DensityMsfGFPMEGFPProtein Degradation

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Castro-Linares, G., den Haan, J., Iv, F., Silva Martins, C., Bertin, A., Mavrakis, M., Koenderink, G. H. Purification and Quality Control of Recombinant Septin Complexes for Cell-Free Reconstitution. J. Vis. Exp. (184), e63871, doi:10.3791/63871 (2022).

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