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Detecção de epítopos sensíveis à neutralização em antígenos exibidos em vacinas baseadas em partículas semelhantes a vírus (VLP) usando um ensaio de captura
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JoVE Journal Immunology and Infection
Detection of Neutralization-sensitive Epitopes in Antigens Displayed on Virus-Like Particle (VLP)-Based Vaccines Using a Capture Assay

Detecção de epítopos sensíveis à neutralização em antígenos exibidos em vacinas baseadas em partículas semelhantes a vírus (VLP) usando um ensaio de captura

português

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05:15 min

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February 10, 2022

DOI:

10.3791/63137-v

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10.3791/63137-v

•

05:15 min
February 10, 2022

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1Research Group Pharmaceutical Biotechnology,TH Köln – University of Applied Sciences, 2Institute of Technical Chemistry,Leibniz University Hannover

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para detectar epítopos de neutralização em partículas semelhantes a vírus que exibem antígenos (VLPs). A imunoprecipitação do vírus da imunodeficiência humana (HIV) derivada de VLPs é realizada usando anticorpos monoclonais específicos de glicoproteínas de envelope acoplados a contas magnéticas conjugadas por G. Os VLPs capturados são posteriormente submetidos à análise de SDS-PAGE e western blot empregando anticorpos específicos da proteína do núcleo viral.

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Virus-like Particle (VLP)Neutralization-sensitive EpitopesCapture AssayBroadly-neutralizing Antibodies (bNABs)Quality AssessmentVaccine CandidatesMagnetic BeadsAntibody BindingWashing BufferSample Incubation

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Rosengarten, J. F., Schatz, S., Stitz, J. Detection of Neutralization-sensitive Epitopes in Antigens Displayed on Virus-Like Particle (VLP)-Based Vaccines Using a Capture Assay. J. Vis. Exp. (180), e63137, doi:10.3791/63137 (2022).

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