Journal
/
Biochemistry
/
Klargjøring av høytemperatur prøvegitter for Cryo-EM
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Preparation of High-Temperature Sample Grids for Cryo-EM

Klargjøring av høytemperatur prøvegitter for Cryo-EM

DOI:
10.3791/62772-v

•

05:05 min

•

July 26, 2021

•

, ,
1Institute of Biological Chemistry,Academia Sinica, 2Academia Sinica Cryo-EM Facility,Academia Sinica, 3Department of Life Sciences,National Central University, 4Hubei University, 5Institute of Biochemical Sciences,National Taiwan University

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:46Preparation of the Vitrification Apparatus
  • 01:23Warming Up the Sample and the Tools
  • 01:49Blotting Experiment
  • 02:47Quality Check for the Grids and Data Collection
  • 03:40Results: High-Temperature Sample Grids for Cryo-EM
  • 04:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Dette papiret gir en detaljert protokoll for å forberede prøvegitter ved temperaturer så høye som 70 ° C, før dypping for kryo-EM-eksperimenter.

Tags

Cryo-EMHigh-temperature SampleProtein StructureTemperature DependenceVitrificationGrid PreparationSample ApplicationBlottingLiquid EthaneElectron Microscopy

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Eksempel forberedelse til masse massespektrometri-baserte identifikasjon av RNA-bindende områder

En alt-i-ett sample holder for makro molekylære X-ray Crystallography med minimal bakgrunn spredning

Prøve forberedelse til sonde elektrospray ionisering massespektrometri

Kryo-EM og enkeltpartikkelanalyse med scipion

En robust kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) prosesseringsarbeidsflyt med kryoSPARC, RELION og scipion

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

Peel-blot-teknikken: En Cryo-EM-prøveprepareringsmetode for å skille enkeltlag fra flerlags eller konsentrerte biologiske prøver

Kryo-EM-datainnsamling med enkeltpartikler med scenetilt ved bruk av Leginon

Prøvepreparering for in situ kryotomografi av pattedyrceller

Anvendelse av monolags grafen til kryo-elektronmikroskopigitter for høyoppløselig strukturbestemmelse

Read Article