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Uma abordagem de mutagénese romance saturação: Caracterização de única etapa de proteína reguladora vinculação Sites no RNA usando fosforotioatos
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A Novel Saturation Mutagenesis Approach: Single Step Characterization of Regulatory Protein Binding Sites in RNA Using Phosphorothioates

Uma abordagem de mutagénese romance saturação: Caracterização de única etapa de proteína reguladora vinculação Sites no RNA usando fosforotioatos

português

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11:49 min

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August 21, 2018

DOI:

10.3791/57816-v

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10.3791/57816-v

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11:49 min
August 21, 2018

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1Department of Molecular, Cellular and Developmental Biology,University of Colorado at Boulder

Summary

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Proteínas que se ligam a sequências específicas de RNA desempenham um papel crítico na expressão do gene. Caracterização detalhada destes sítios de ligação é fundamental para nossa compreensão da regulação genética. Aqui, uma abordagem passo a passo para mutagénese saturação de proteína ligadora de sites no RNA é descrita. Esta abordagem é relevante para todos os sites de proteína ligadora de RNA.

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Saturation MutagenesisPhosphorothioatesRNAProtein Binding SiteIn Vitro TranscriptionT7 RNA Polymerase5′ End LabelingAlpha-thio NTPAlkaline PhosphataseT4 Polynucleotide KinaseGene Regulation

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Singh, R. A Novel Saturation Mutagenesis Approach: Single Step Characterization of Regulatory Protein Binding Sites in RNA Using Phosphorothioates. J. Vis. Exp. (138), e57816, doi:10.3791/57816 (2018).

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