IHC de Drosophila Larval

A imunohistoquímica (IHC) é uma técnica usada para visualizar a presença e localização de proteínas dentro dos tecidos. As larvas de drosophila são particularmente favoráveis ao IHC devido à facilidade com que podem ser processadas para coloração. Além disso, as larvas são transparentes, o que significa que alguns tecidos podem ser visualizados sem a necessidade de dissecção.

No IHC, as proteínas são finalmente detectadas com anticorpos que se ligam especificamente a “epítopos” dentro da proteína de interesse. Para preservar esses epítopos, os tecidos devem ser fixados antes da coloração. Além disso, para que os anticorpos penetrem nas membranas, as células devem ser permeabilizadas com detergentes. Este artigo em vídeo oferece uma visão detalhada dos reagentes, ferramentas e procedimentos necessários para a coloração de tecidos larvais dissecados, incluindo fixação, bloqueio e etapas de coloração. Destaque também para uma demonstração de técnicas de montagem de tecidos para microscopia de fluorescência. Finalmente, são fornecidos exemplos da ampla gama de aplicações para essas técnicas (e algumas variações sobre elas).