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Rilevamento di palmitoilazione proteina in colture di neuroni ippocampali di immunoprecipitazione e di acil-Biotina Exchange (ABE)
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Chapters
- 00:05Title
- 02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
- 05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
- 09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
- 10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
- 12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
- 16:07Conclusion
L'aggiunta di palmitato reversibile alle proteine è un importante regolatore del traffico intracellulare delle proteine. Questo è di particolare interesse in neuroni dove sono palmitoilato molte proteine sinaptiche. Utilizziamo un metodo semplice biochimico per rilevare le proteine palmitoilato in neuroni in coltura, che possono essere adattati per più tipi di cellule e tessuti.
