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Suivi des réduction et par oxydation demi-réactions d'une monooxygénase flavine-dépendante à l'aide Stopped-Flow Spectrophotométrie
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March 18, 2012
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Nous décrivons l'utilisation d'un instrument stopped-flow d'enquêter sur les deux réductrices et l'oxydation des demi-réactions de<em> Aspergillus fumigatus</em> Un sidérophore (Asdi), une monooxygénase flavine-dépendante. Nous montrons ensuite les spectres correspondant à des espèces dans la réaction de l'Asdi et nous calculons les constantes de vitesse de leur formation.
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Stopped-flow SpectrophotometryFlavin-dependent MonooxygenaseAspergillus Fumigatus Siderophore A (SidA)Hydroxylation Of OrnithineBiosynthesis Of Hydroxamate SiderophoresReductive Half-reactionOxidative Half-reactionFADNADPHC4a-hydroperoxyflavin IntermediateMeasurement Of RatesSpectral FormsStopped-flow InstrumentAnaerobic Glove BoxSingle ModeDouble Mixing Settings
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Romero, E., Robinson, R., Sobrado, P. Monitoring the Reductive and Oxidative Half-Reactions of a Flavin-Dependent Monooxygenase using Stopped-Flow Spectrophotometry. J. Vis. Exp. (61), e3803, doi:10.3791/3803 (2012).
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