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February 25, 2011
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Um grande impedimento para análises bioquímicas dos ribossomos contendo nascente peptidil-tRNAs foi a presença de ribossomos outros nas mesmas amostras, os ribossomos não estão envolvidos na tradução da seqüência de mRNA específico que está sendo analisado. Nós desenvolvemos uma metodologia simples para purificar, exclusivamente, os ribossomos que contém a nascente peptidil-tRNA de interesse.
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IsolationTranslating RibosomesPeptidyl-tRNAsFunctional AnalysisStructural AnalysisAntibioticsProtein Synthesis InhibitionNascent Polypeptide SynthesisPeptide Bond Formation InhibitionTranslation Termination InhibitionTranslational ArrestGene Expression RegulationRibosome Function AlterationMRNA PurificationBiotin-labeled MRNA
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Shirole, N., Balasubramanian, S., Yanofsky, C., Cruz-Vera, L. Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses. J. Vis. Exp. (48), e2498, doi:10.3791/2498 (2011).
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