This content is Free Access.
Chapters
- 00:00Title
- 00:57Introduction
- 01:58Preparing Anti-PECAM-1 Antibody-Conjugated Magnetic Beads
- 03:36Isolating Mouse Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice
- 06:56Sorting Mouse Lung Endothelial Cells with Anti-ICAM-2 Dynabeads
- 09:13Evaluation of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice
- 09:57Conclusion
Här beskriver vi ett protokoll för isolering och odling av murina pulmonell endotelceller. Denna metod består av mekaniker och enzymatiska lungvävnad dissociation samt en 2-stegs reningsprocess med hjälp av anti-PECAM-1 och anti-ICAM-2 antikroppar konjugerade till magnetiska kulor, vilket ger en ren endotelceller befolkning mestadels mikrovaskulära ursprung.
Tags
IsolationCulturePulmonary Endothelial CellsNeonatal MiceResearch ModelVascular BiologyHuman Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVECs)Microvascular Endothelial Cells (ECs)AngiogenesisPermeabilityKnockout MiceProtein Function AnalysisIsolation ProtocolCulturing ProtocolMouse Lung Endothelial Cells (MLECs)Collagenase/dispase (C/D) SolutionSingle-cell SuspensionPositive SelectionAnti-PECAM-1 AntibodyDynabeadsMagnetic Particle Concentrator (MPC)
