Dergi
/
Biyokimya
/
Оптимизированный количественный анализ РНК-связывающих белков с использованием короткой биотинилированной РНК
JoVE Journal
Biyokimya
This content is Free Access.
JoVE Journal Biyokimya
An Optimized Quantitative Pull-Down Analysis of RNA-Binding Proteins Using Short Biotinylated RNA
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Оптимизированный количественный анализ РНК-связывающих белков с использованием короткой биотинилированной РНК

DOI:
10.3791/64923-v

•

07:55 min

•

February 17, 2023

•

, , , ,
1Center for Human Technology,Italian Institute of Technology (IIT), 2Department of Experimental Oncology,European Institute of Oncology (IEO), 3Department of Biology and Biotechnologies ‘Charles Darwin’,Sapienza University of Rome

Bölümler

  • 00:05Introduction
  • 00:42Total Protein Harvest and Protein Concentration Determination
  • 01:48Bead Preparation
  • 03:12Bead Loading and Protein Binding on Beads
  • 04:13Washing of Nonspecific Binders
  • 04:53Elution of Specific Binders
  • 05:39Results: Quantification and Validation of Protein Interactors of Specific RNA Sequences
  • 07:24Conclusion

Özet

Otomatik Çeviri

Otomatik Çeviri

Здесь мы представляем оптимизированный метод in vitro для обнаружения, количественного определения и проверки белковых интеракторов определенных последовательностей РНК с использованием экстракта общего белка из клеток человека, шариков стрептавидина, покрытых биотинилированной РНК, и масс-спектрометрического анализа.

Etiketler

RNA-binding ProteinsPull-down AnalysisBiotinylated RNAProtein ComplexesHEK 293T CellsLysis BufferMagnetic BeadsYeast TRNARNA Oligonucleotide

Article

Embed

ÇALMA LİSTESİNE EKLE

Usage Statistics

İlgili Videolar

Выделение липопротеидов высокой плотности для Некодирующих малых РНК квантификации

Оптимизированный протокол для электрофоретической подвижности Сдвиг Пробирной с помощью ИК-флуоресцентным красителем-меченных

Эффективный метод для выделения высокоочищенного РНК из семян для использования в количественном анализе Транскриптом

Очистка биотинилированных клеточных поверхностных белков от<em> Ripicephalus microplus</em> Эпителиальные кишечные клетки

Оптимизированный протокол для извлечения белков из митрального клапана человека

Пробоподготовка для массы на основе спектрометрии идентификации RNA-связывая регионов

Захват и идентификации RNA-связывая протеинов с помощью щелчка при содействии химия РНК interactome захвата (ЦАРСКОЕ) стратегии

Pepti'uick, одноступенчатая инкорпорация мембранных белков в биотинилатированные пептидиски для оптимизированных белковых связывающих анализов

Убиквитин Цепной Анализ параллельным мониторингом реакции

Поперечное секционирование зрелого риса (Oryza sativa L.) Ядра для сканирующей электронной микроскопии с использованием наконечников пипеток в качестве поддержки иммобилизации

Read Article