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グルカンホスファターゼの基質結合を測定するためのコンカナバリンAベースの沈降アッセイ
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Concanavalin A-Based Sedimentation Assay to Measure Substrate Binding of Glucan Phosphatases
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グルカンホスファターゼの基質結合を測定するためのコンカナバリンAベースの沈降アッセイ

DOI:
10.3791/64700-v

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09:07 min

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December 23, 2022

•

, , , ,
1Kimya Bölümü,Skidmore College

Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:03Preparation of ConA‐Sepharose Beads and ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
  • 02:19Starch Excess4 (SEX4) Protein Binding with ConA‐Sepharose: Amylopectin Beads
  • 03:41Running SDS‐PAGE Gels
  • 04:27Western Blotting for Chemiluminescence Detection and Data Analysis
  • 06:28Results: Binding Affinity of SEX4 to ConA‐Sepharose‐Amylopectin Beads
  • 08:18Conclusion

Özet

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この方法は、グルカンホスファターゼとアミロペクチンの結合親和性を定量化するためのレクチンベースの in vitro 沈降アッセイを記載する。この共沈降アッセイは、グルカンホスファターゼ基質結合の測定に信頼性が高く、さまざまな可溶化グルカン基質に適用できます。

Etiketler

Concanavalin ASedimentation AssayGlucan PhosphatasesSubstrate BindingCarbohydrate-protein InteractionsSEX4 MutantsAmylopectinBinding BufferCentrifugationProtease Inhibitor

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