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マウスの発達中の卵巣保護区の定量的3D分析のための全卵巣免疫蛍光、クリアリング、および多光子顕微鏡
JoVE Journal
Gelişim Biyolojisi
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JoVE Journal Gelişim Biyolojisi
Whole Ovary Immunofluorescence, Clearing, and Multiphoton Microscopy for Quantitative 3D Analysis of the Developing Ovarian Reserve in Mouse

マウスの発達中の卵巣保護区の定量的3D分析のための全卵巣免疫蛍光、クリアリング、および多光子顕微鏡

DOI:

12:36 min

September 03, 2021

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:00Perfusion, Dissection, and Fixation of Pubertal Ovaries
  • 02:34Whole-Mount Ovary Immunostaining
  • 03:59Clearing of Immunostained Whole-Mount Ovaries
  • 04:54Sample Setup and Imaging with a Multiphoton Microscope
  • 06:54Oocyte Quantification
  • 09:28Results: Quantitative and Qualitative Analysis of the Ovaries Using Immunostaining, Multiphoton Microscopy, and 3D Visualization
  • 11:51Conclusion

Özet

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ここでは、ホールマウント免疫染色、多光子顕微鏡、および3D可視化および分析を使用した定量的および定性的な分析のために、卵巣全体をイメージングするための最適化されたプロトコルを紹介します。このプロトコルは、毒物学、臨床診断、および卵巣機能のゲノムアッセイに適用可能な、高スループットで信頼性が高く、再現性のある処理に対応します。

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