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Estudios de interacciones chaperona-cochaperona utilizando un ensayo homogéneo basado en cuentas
Bölümler
- 00:04Introduction
- 01:28Coupling of Hsp90 C-Terminal Peptide to the Acceptor Beads
- 02:49Assay for Interaction Between GST-FKBP51 or GST-FKBP52 and Hsp90 C-Terminal Peptide and Inhibition with Small Molecular Mass Compounds
- 04:14Dose-Response Curve Generation and IC50 Calculation
- 04:58Results: Inhibitory Effect of Small Molecular Weight Test Compound D10
- 05:59Conclusion
Este protocolo presenta una técnica para sondear las interacciones proteína-proteína utilizando perlas de donantes ligadas al glutatión con co-chaperonas con motivos TPR fusionadas con GST y perlas aceptoras junto con un péptido derivado de Hsp90. Hemos utilizado esta técnica para detectar moléculas pequeñas para interrumpir las interacciones Hsp90-FKBP51 o Hsp90-FKBP52 e identificado inhibidores potentes y selectivos de la interacción Hsp90-FKBP51.
