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Isolamento nuclei dal tessuto intero utilizzando un metodo detergente e senza enzimi
JoVE Journal
Biyoloji
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JoVE Journal Biyoloji
Nuclei Isolation from Whole Tissue using a Detergent and Enzyme-Free Method

Isolamento nuclei dal tessuto intero utilizzando un metodo detergente e senza enzimi

DOI:

07:00 min

June 24, 2020

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparation for Tissue Dissection
  • 01:36Zebrafish Brain Dissection and Single Nuclei Isolation
  • 03:59FACS Based Nuclei Enrichment
  • 05:16Results: Single Nuclei Isolation and Enrichment
  • 06:04Conclusion

Özet

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L'isolamento dei nuclei singoli si basa sulla dissociazione e sulla permeabilizzazione a base di detersivo della membrana cellulare, passaggi che necessitano di ottimizzazione e soggetti a introdurre artefatti tecnici. Dimostriamo un protocollo detergente e privo di enzimi per un rapido isolamento dei nuclei intatti direttamente dall'intero tessuto, producendo nuclei adatti per singolo nucleo RNA-seq (snRNA-seq) o ATAC-seq.

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