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Aislamiento de núcleos de tejido entero utilizando un método de detergente y libre de enzimas
JoVE Journal
Biyoloji
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JoVE Journal Biyoloji
Nuclei Isolation from Whole Tissue using a Detergent and Enzyme-Free Method

Aislamiento de núcleos de tejido entero utilizando un método de detergente y libre de enzimas

DOI:

07:00 min

June 24, 2020

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparation for Tissue Dissection
  • 01:36Zebrafish Brain Dissection and Single Nuclei Isolation
  • 03:59FACS Based Nuclei Enrichment
  • 05:16Results: Single Nuclei Isolation and Enrichment
  • 06:04Conclusion

Özet

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El aislamiento de núcleos individuales se basa en la disociación y la permeabilización basada en detergente de la membrana celular, pasos que necesitan optimización y son propensos a introducir artefactos técnicos. Demostramos un protocolo libre de detergente y enzimas para el aislamiento rápido de núcleos intactos directamente de todo el tejido, produciendo núcleos adecuados para ARN-seq de un solo núcleo (snRNA-Seq) o ATAC-seq.

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