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Studio pre-formato Fibril indotta accumulazione di z-sinucleina in primario embrionale Midbrain Dopamine Neuroni
JoVE Journal
Nörobilim
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JoVE Journal Nörobilim
Studying Pre-formed Fibril Induced α-Synuclein Accumulation in Primary Embryonic Mouse Midbrain Dopamine Neurons

Studio pre-formato Fibril indotta accumulazione di z-sinucleina in primario embrionale Midbrain Dopamine Neuroni

DOI:

10:03 min

August 16, 2020

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Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
  • 01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
  • 04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
  • 06:21High-Content Image Analysis
  • 07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
  • 09:13Conclusion

Özet

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Qui, vi presentiamo un protocollo dettagliato per studiare l'accumulo neuronale di sinucleina nei neuroni primari della dopamina del topo. Gli aggregati di sibbonucleina fosfolati nei neuroni sono indotti con fibrille pre-formate e sinucleina. L'imaging automatizzato di cellule etichettate immunofluorescentmente e l'analisi imparziale dell'immagine rendono questo protocollo robusto adatto per lo screening della produttività medio-alta di farmaci che inibiscono l'accumulo di sinucleina.

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