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Toeprinting analyse de Translation Initiation complexe formé sur l’ARNm chez les mammifères
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Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs
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Toeprinting analyse de Translation Initiation complexe formé sur l’ARNm chez les mammifères

DOI:
10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

,
1Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, 2Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, 3Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 00:34Preparation of mRNA
  • 02:59Toeprinting Assay
  • 06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
  • 07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
  • 09:35Conclusion

Özet

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Toeprinting a pour but de mesurer la capacité de in vitro transcrit RNA pour former des complexes initiation traduction de ribosomes dans une variété de conditions. Ce protocole décrit une méthode pour toeprinting ARN chez les mammifères et peut être utilisé pour étudier la traduction fois cap-dépendante et pilotée par l’IRES.

Etiketler

Toeprinting AnalysisTranslation Initiation ComplexMammalian MRNAsIRESRNA PurificationRabbit Reticulocyte LysateRNase InhibitorATPGMP-PNPDTTSpermidine

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