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Sistemas inducibles y constitutivos para la modificación genética In Vivo de hepatocitos de ratón mediante la inyección en la vena hidrodinámica cola
JoVE Journal
Genetik
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JoVE Journal Genetik
Constitutive and Inducible Systems for Genetic In Vivo Modification of Mouse Hepatocytes Using Hydrodynamic Tail Vein Injection

Sistemas inducibles y constitutivos para la modificación genética In Vivo de hepatocitos de ratón mediante la inyección en la vena hidrodinámica cola

DOI:

09:35 min

February 02, 2018

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Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 00:52Recombinatorial Cloning to Generate Ready-for-injection Clones
  • 02:23Hydrodynamic Tail Vein Injection
  • 04:22Induction of Transfected CreER with Tamoxifen
  • 05:33Induction of Tetracycline-dependent Gene or shRNA Expression
  • 06:35Preparation of Mouse Liver for Analysis by Immunostaining
  • 07:30Results: Constitutive and Inducible Gene Expression in the Liver Following HTVI
  • 08:47Conclusion

Özet

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Inyección en la vena hidrodinámica cola de vectores de integración basado en el transposón permite la transfección estable de hepatocitos murinos en vivo. Aquí, presentamos un protocolo práctico para sistemas de transfección que permite la expresión constitutiva a largo plazo de un solo transgen o expresión constitutiva e inducible de doxiciclina combinada de un transgén o miR-shRNA en el hígado.

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