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Isolamento de Ribossomos Traduzindo Contendo peptidil-tRNAs para análises funcionais e estruturais
Bölümler
- 00:05Başlık
- 02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
- 04:28Preparation of a DNA Template
- 05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
- 06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
- 07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
- 09:23Representative Results
- 10:52Conclusion
Um grande impedimento para análises bioquímicas dos ribossomos contendo nascente peptidil-tRNAs foi a presença de ribossomos outros nas mesmas amostras, os ribossomos não estão envolvidos na tradução da seqüência de mRNA específico que está sendo analisado. Nós desenvolvemos uma metodologia simples para purificar, exclusivamente, os ribossomos que contém a nascente peptidil-tRNA de interesse.
Etiketler
IsolationTranslating RibosomesPeptidyl-tRNAsFunctional AnalysisStructural AnalysisAntibioticsProtein Synthesis InhibitionNascent Polypeptide SynthesisPeptide Bond Formation InhibitionTranslation Termination InhibitionTranslational ArrestGene Expression RegulationRibosome Function AlterationMRNA PurificationBiotin-labeled MRNA
