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Isolamento dei ribosomi Tradurre contenenti peptidil-tRNA per le analisi funzionali e strutturali
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Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses
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Isolamento dei ribosomi Tradurre contenenti peptidil-tRNA per le analisi funzionali e strutturali

DOI:
10.3791/2498-v

•

11:19 min

•

February 25, 2011

•

, , ,
1Department of Biological Sciences,University of Alabama Huntsville, 2Biyoloji Bölümü,Stanford University

Bölümler

  • 00:05Başlık
  • 02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
  • 04:28Preparation of a DNA Template
  • 05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
  • 06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
  • 07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
  • 09:23Representative Results
  • 10:52Conclusion

Özet

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Un ostacolo importante per le analisi biochimiche dei ribosomi contenente nascente peptidil-tRNA è stata la presenza di ribosomi altri nei medesimi campioni, i ribosomi non coinvolti nella traduzione della sequenza di mRNA specifico oggetto di analisi. Abbiamo sviluppato una metodologia semplice per purificare, esclusivamente, i ribosomi contenente il nascente peptidil-tRNA di interesse.

Etiketler

IsolationTranslating RibosomesPeptidyl-tRNAsFunctional AnalysisStructural AnalysisAntibioticsProtein Synthesis InhibitionNascent Polypeptide SynthesisPeptide Bond Formation InhibitionTranslation Termination InhibitionTranslational ArrestGene Expression RegulationRibosome Function AlterationMRNA PurificationBiotin-labeled MRNA

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