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EsiRNA MISSION pour le dépistage de l'ARNi dans les cellules de mammifères
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MISSION esiRNA for RNAi Screening in Mammalian Cells
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EsiRNA MISSION pour le dépistage de l'ARNi dans les cellules de mammifères

DOI:
10.3791/2008-v

•

15:31 min

•

May 12, 2010

•

,
1Max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics

Bölümler

  • 00:00Başlık
  • 01:43Introduction
  • 02:22Use of High-Quality MISSION esiRNA Libraries for RNAi Screening
  • 03:49Optimizing Transfection Prior to Screening
  • 05:28Setting Up the Assay and Preparing for the Primary Screen
  • 09:34The Primary Screen
  • 12:03Secondary Screen of the Selected Genes for Hit Validation
  • 13:40Representative Results Screening for Mammalian Cell Cycle Genes Using MISSION esiRNA
  • 14:43Conclusion

Özet

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Ici, nous utilisons une bibliothèque esiRNA homme dans un écran à haut débit pour les gènes impliqués dans la division cellulaire. Nous démontrons comment mettre en place et mener une esiRNA écrans, ainsi que la façon d'analyser et de valider les résultats.

Etiketler

MISSION EsiRNARNAi ScreeningMammalian CellsGene Expression ControlSmall Interfering RNAs (siRNAs)DicerRNA-induced Silencing Complex (RISC)Target MRNA CleavageLoss Of Gene Function StudiesChemical Synthesis Of SiRNAsEndonucleolytic CleavageTarget-specific Long Double-stranded RNAsRNase IIIEndoribonuclease-prepared SiRNAEfficacy Of SiRNAs And EsiRNAsOff-target Effects

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