모터 회복의 평가는 실험적인 말초 신경 연구에서 벤치마크 결과 측정으로 남아 있습니다. 쥐의 티볼리스 전방 근육의 동면 파탄력 측정은 경련성 신경 결함의 재구성 후 기능적 결과를 평가하는 귀중한 도구입니다. 방법과 뉘앙스는이 문서에 자세히 설명되어 있습니다.
외상성 신경 상해는 상당한 기능적인 손실 귀착되고 세그먼트 신경 결함은 수시로 자가 간 신경 이식의 사용을 필요로 합니다. 그들의 제한된 가용성 및 관련 기증자 측 이환율 때문에, 신경 재생 의 필드에 있는 많은 연구 결과는 세그먼트 신경 격차를 다리를 내기 위하여 대체 기술에 집중합니다. 외과 또는 약리학적 실험 치료 옵션의 결과를 조사하기 위해 쥐 시차 신경 모델은 종종 생체 분석으로 사용됩니다. 쥐 모델에는 신경 재생의 정도를 결정하는 다양한 결과 측정이 있습니다. 대상 근육의 최대 출력 력은 실험 요법의 임상 번역을 위한 가장 관련성이 높은 결과로 남아 있습니다. 파상성 근육 수축의 동급력 측정은 이전에 쥐와 토끼 모델 모두에서 신경 부상 또는 수리 후 모터 회복을 평가하기위한 재현 가능하고 유효한 기술로 설명되었습니다. 이 비디오에서는 최적화된 매개 변수를 사용하여 쥐 좌골 신경 결함 모델에서 티비알리스 전방 근육의 기능적 회복을 평가하는 이 귀중한 절차의 단계별 지침을 제공할 것입니다. 우리는 일반적인 관상 신경 및 티볼리스 전방 근육 힘줄의 외과 접근 그리고 해부 이외에 필요한 외과 전 준비를 설명할 것입니다. 등대식 파탄력 측정 기법이 상세합니다. 최적의 근육 길이 와 자극 펄스 주파수를 결정하고 최대 파상풍 근육 수축을 측정하는 것이 입증된다.
외상성 말초 신경 손상에 따른 운동 기능의 상실은 환자의 삶의 질과 사회경제적 상태에 큰 영향을 미친다1,2,3. 이 참을성 있는 인구의 예후는4년 동안 외과 기술에 있는 최소한의 개선 때문에 가난한 남아 있습니다. 직접 엔드 투 엔드 장력 없는 상신성 수리금 은제 수술 재건을 형성합니다. 그러나, 자가 신경 이식의 확장된 신경 간격 의 상호 처리가 있는 경우에우수한것으로 입증되었습니다5,6. 관련 기증자 부위 이환율 및 자가 신경 이식의 제한된 가용성은 대체 기술에 대한 필요성을부과했다7,8.
실험적인 동물 모델은 말초 신경 재생의 메커니즘을 해명하고 다양한 재건 및 약리학적 치료 옵션의 결과를 평가하는 데 사용되어 왔다8,9. 쥐 상골 신경 모델은 가장 자주 사용되는 동물모델(10)이다. 그들의 작은 크기는 쉽게 처리하고 집을 수 있습니다. 그들의 최상급 신경 재생 잠재력으로 인해, 결과의 내정간섭 그리고 평가 사이 감소된 시간은 상대적으로 더 낮은 비용11,12귀착될 수 있습니다. 그 사용의 다른 장점은 인간 신경 섬유에 형태학적 유사성과 비교 / 역사적 연구의 높은 수를 포함한다13. 후자는 신중하게 접근해야하지만, 연구 사이의 다양한 결과 측정으로 결과14,15,16,17,18을비교하기가 어렵다.
신경 재생 범위를 평가하는 결과 측정은 전기생리학에서 히스토모홈에 이르기까지 다양하지만, 이러한 방법은 상관관계를 암시하지만 반드시 직접 운동기능(14,15)의반환을 측정하지는 않는다. 재생 신경 섬유기능 연결 의 수의 과대 평가를 일으킬 수있는 적절한 연결을하지 않을 수 있습니다14,15,19,20. 최종 장기의 올바른 재관전을 입증하기 위한 가장 우수하고 임상적으로 가장 관련성이 가장 좋은 측정은 근육기능(21,22,23)에대한 평가를 유지한다. 그러나 동물 모델에 대한 모터 기능 평가 도구를 만드는 것은 어려운 일입니다. Medinaceli 외. 먼저 실험적인 말초 신경 연구에서 기능적 회복을 평가하는 가장 자주 사용되는 방법인 워킹 트랙 분석을 설명하였으며,21,24,25,26,27, 28. 보행 트랙 분석은 걷는 쥐21,29에서발자국의 측정을 기반으로 좌골 기능 지수 (SFI)를 정량화한다. 발가락 수축, 자동 절단, 인쇄의 번짐 및 다른 재관전 측정과 의 상관 관계가 좋지 않은 것과 같은 보행 트랙 분석의 주요 한계는 기능적회복(30)및31의정량화를 위한 다른 파라미터의 사용을 필요로 한다.
루이스쥐(32)와 뉴질랜드 토끼(33)의 이전 연구에서, 우리는 티비알리스 전방(TA) 근육에 대한 등도성 파상력(ITF) 측정을 검증하고 신경 수리34,35,36,37,38,39의다양한 유형의 신경 회복 후 근육 회복평가에서 그 효과를 입증하였다. TA 근육은 상대적으로 큰 크기 때문에 잘 적합, sciatic 신경의 연속 적 분지및 잘 해명 생화 확성 특성에 의해 내부40,41,42,43. 근육 길이(preload force) 및 전기 파라미터가 최적화되면 ITF는쥐(32)와 토끼(33)에서각각 4.4%와 7.5%의 좌우 가변성을 제공한다.
이 문서는 쥐 강차 신경 모델에서 ITF 측정의 상세한 프로토콜을 제공합니다, 필요한 사전 수술 계획의 철저한 설명을 포함, 수술 접근 및 일반적인 관상 신경및 해부 TA 근육 힘줄. 자극 강도 및 지속 시간에 미리 정해진 값을 사용하여 최적의 근육 길이 및 자극 펄스 주파수가 정의됩니다. 이 네 가지 매개 변수를 사용하면 ITF를 일관되고 정확하게 측정할 수 있습니다.
이 프로토콜은 쥐모델(32)에서TA 근육의 정확한 최대 ITF 측정값을 획득하기 위한 이전에 검증된 방법을 설명합니다. 실험신경 재건 치료 후 최대 강도의 회복은 신경이 재생뿐만 아니라 대상 근육과 작업 연결을 했다는 것을 증명하기 때문에 임상 설정에 대한 주요 관심사입니다. ITF는 쥐 상골 신경모델(32)과같은 작은 신경 갭 모델에서 사용될 수 있으며, 프로토…
The authors have nothing to disclose.
이 간행물에 보고된 연구는 상 번호 RO1 NS 102360의 밑에 건강의 국가 학회의 신경장애 그리고 치기의 국가 학회에 의해 지원되었습니다. 이 내용은 전적으로 저자의 책임이며 반드시 국립 보건원의 공식 견해를 나타내는 것은 아닙니다.
0.9% Sodium Chloride | Baxter Healthcare Corporation, Deerfield, IL, USA | G130203 | |
1 mm Kirshner wires | Pfizer Howmedica, Rutherford, NJ | N/A | |
Adson Tissue Forceps | ASSI, Westbury, NY, USA | MTK-6801226 | |
Bipolar electrode cables | Grass Instrument, Quincy, MA | N/A | |
Bipolar stimulator device | Grass SD9, Grass Instrument, Quincy, MA | N/A | |
Cotton-tip Applicators | Cardinal Health, Waukegan, IL, USA | C15055-006 | |
Curved Mosquito forceps | ASSI, Westbury, NY, USA | MTK-1201112 | |
Force Transducer MDB-2.5 | Transducer Techniques, Temecula, CA | N/A | |
Gauze Sponges 4×4 | Covidien, Mansfield, MA, USA | 2733 | |
Ground cable | Grass Instrument, Quincy, MA | N/A | |
Isoflurane chamber | N/A | N/A | Custom-made |
Ketamine | Ketalar, Par Pharmaceutical, Chestnut, NJ | 42023-115-10 | |
LabView Software | National Instruments, Austin, TX | ||
Loop | N/A | N/A | Custom-made |
Microsurgical curved forceps | ASSI, Westbury, NY, USA | JFA-5B | |
Microsurgical scissors | ASSI, Westbury, NY, USA | SAS-15R-8-18 | |
Microsurgical straight forceps | ASSI, Westbury, NY, USA | JF-3 | |
Retractor | ASSI, Westbury, NY, USA | AG-124426 | |
Scalpel Blade No. 15 | Bard-Parker, Aspen Surgical, Caledonia, MI, USA | 371115 | |
Slim Body Skin Stapler | Covidien, Mansfield, MA, USA | 8886803512 | |
Subminiature electrode | Harvard Apparatus, Holliston, MA | N/A | |
Surgical Nerve Stimulator | Checkpoint Surgical LCC, Cleveland, OH, USA | 9094 | |
Terrell Isoflurane | Piramal Critical Care Inc., Bethlehem, PA, USA | H961J19A | |
Testing platform | N/A | N/A | Custom-made |
Tetontomy Scissors | ASSI, Westbury, NY, USA | ASIM-187 | |
Traceable Big-Digit Timer/Stopwatch | Fisher Scientific, Waltham, MA, USA | S407992 | |
USB-6009 multifunctional I/O data acquisition (DAQ) device | National Instruments, Austin, TX | 779026-01 | |
Vacuum Base Holder | Noga Engineering & Technology Ltd., Shlomi, Isreal | N/A | Attached clamp is custom-made |
Weight (10 g) | Denver Instruments, Denver, CO, USA | 820010.4 | |
Weight (20 g) | Denver Instruments, Denver, CO, USA | 820020.4 | |
Weight (50 g) | Denver Instruments, Denver, CO, USA | 820050.4 | |
Xylazine | Xylamed, Bimeda MTC Animal Health, Cambridge, Canada | 1XYL002 |