Здесь мы описываем протокол для индукции мурин черепно-мозговой травмы с помощью открытой головой контролируемого коркового удара.
Центры по контролю и профилактике заболеваний подсчитали, что почти 2 миллиона человек выдерживают черепно-мозговую травму (TBI) каждый год в Соединенных Штатах. В самом деле, ТБИ является фактором, способствующим более чем треть всех связанных с травмами смертности. Тем не менее, клеточные и молекулярные механизмы, лежащие в основе патофизиологии ТБИ, плохо изучены. Таким образом, доклинические модели TBI, способные воспроизвоблять механизмы травматизма, относящимся к ТБИ у пациентов с человеком, являются важнейшей потребностью в исследованиях. Модель tBI контролируемого кортикового удара (CCI) использует механическое устройство для непосредственного воздействия на обнажённое короеистое устройство. Хотя ни одна модель не может в полной мере резюмировать разрозненные модели травм и неоднородный характер ТБИ у пациентов с людьми, CCI способен индуцировать широкий спектр клинически применимых ТБИ. Кроме того, ТПП легко стандартизируется, позволяя следователям сравнивать результаты как в экспериментах, так и в следственных группах. Следующий протокол представляет собой подробное описание применения тяжелой ТПП с коммерчески доступным ударным устройством в модели Murine TBI.
Центры по контролю и профилактике заболеваний оценкам, что около 2 миллионов американцев поддерживать черепно-мозговую травму (TBI) каждый год1,2. В самом деле, TBI способствует более 30% всех травм, связанных смертей в Соединенных Штатах с расходами на здравоохранение приближается к $ 80 млрд в год и почти $ 4 млн на человека в год выживших тяжелых TBI3,4,5. Влияние TBI подчеркивается значительными долгосрочными нейрокогнитивными и нейропсихиатрическими осложнениями, пережитыми его выжившими с коварным началом поведенческих, когнитивных и двигательных нарушений, называемых хронической травматической энцефалопатией (ХТЭ) 6 , 7 (г. , 8 , 9 До 9 , 10. Даже субклинические сотрясательные события – те воздействия, которые не приводят к клиническим симптомам – могут привести к длительной неврологической дисфункции11,12.
Модели животных для изучения TBI были использованы с конца 1800-хгодов 13. В 1980-х годах был разработан пневматический ударник для моделирования ТБИ. Этот метод теперь называется контролируемым коркового воздействия (CCI)14. Контроль и воспроизводимость ТПП привели исследователей к адаптации модели для использования у грызунов15. Наша лаборатория использует эту модель, чтобы побудить TBI через коммерчески доступный ударный и электронный устройство активации16,17. Эта модель способна производить широкий спектр клинически применимых состояний TBI в зависимости от используемых биомеханических параметров. Гистологическая оценка мозга ТБИ после тяжелой травмы, вызванной в нашей лаборатории, демонстрирует значительную ипсилатеральную корковую и гиппокампа, а также контралатеральный отек и искажение. Кроме того, CCI производит последовательное ухудшение двигательных и когнитивных функций, измеряемых поведенческими анализами18. Ограничения ccI включают необходимость краниотомии и расходы на приобретение ударного и актуирующего устройства.
Несколько дополнительных моделей TBI существуют и хорошо зарекомендовали себя в литературе, включая боковую модель ударных жидкости, модель падения веса, и модель травмы взрыва19,20,21. Хотя каждая из этих моделей имеют свои собственные преимущества, их основными недостатками являются смешанные травмы, высокая смертность и отсутствие стандартизации, соответственно22. Кроме того, ни одна из этих моделей не предлагает точности, точности и воспроизводимости ТПП. Регулируя биомеханические параметры, вводимые в актуирующее устройство, модель CCI позволяет следователю точно контролировать размер травмы, глубину травмы и кинетическую энергию, применяемую к мозгу. Это дает следователям возможность применять весь спектр TBI к конкретным областям мозга. Это также позволяет наибольшее воспроизводимость от эксперимента к эксперименту.
Есть несколько шагов, которые имеют решающее значение для применения надежной и последовательной травмы. Во-первых, мышь должна достичь глубокой плоскости хирургической анестезии, не обеспечивая движения во время выполнения краниэктомии. Хотя многочисленные анестезии могут быть исп?…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Национальными институтами здравоохранения Грант GM117341 и Американский колледж хирургов C. Джеймс Каррико научно-исследовательского стипендий S.J.S.
AnaSed Injection Xylazine Sterile Solution | LLOYD, Inc. | 5939911020 |
Buprenorphine SR Lab 0.5mg/mL | Zoopharm-Wildlife Pharmaceuticals USA | BSRLAB0.5-182012 |
High Speed Rotary Micromotor KiT0 | Foredom Electric Company | K.1070 |
Imapact one for Stereotaxix CCI | Leica Biosystems Nussloch GmbH | 39463920 |
Ketathesia Ketamine HCl Injection USP | Henry Schein, Inc | 56344 |
Mouse Specific Stereotaxic Base | Leica Biosystems Nussloch GmbH | 39462980 |
Trephines for Micro Drill | Fine Science Tools, Inc | 18004-50 |