이 의정서는 바다 거북 샘플의 수집에 초점을 맞추고, 수집 된 해양 쓰레기의 분류 및 정량화에 동물 회복 및 부검에서 모든 단계를 설명. 또한, 대표적인 결과는 수집 된 데이터를 사용 하 여 양호한 환경 상태에 대 한 가능한 임계값을 정교 하 게 하는 방법을 보여준다.
다음 프로토콜은 해양 동물이 섭취 한 쓰레기의 양과 관련 된 수수료 결정 (EU)에 보고 된 D10C3 기준에 대 한 유럽 연합의 해양 전략 프레임 워크 지침 (MSFD)에 의해 설정 된 요구 사항에 응답 하기 위한 것입니다. 사해 거북이에서 수집 된 쓰레기를 추출 하기 위한 표준화 된 방법론은 데이터 분석에 대 한 지침과 함께 제공 됩니다. 이 프로토콜은 사해 거북이의 수집과 분해 상태에 따른 샘플 분류로 시작 됩니다. 거북이 네 롭 시는 공인 센터에서 수행 되어야 하며 여기에 설명 된 프로토콜은 위 장관 (GI) 분리에 가장 적합 한 절차를 설명 합니다. GI의 세 부분 (식도, 위, 내장)은 1mm 메쉬 체를 사용 하 여 여과 하 여 길이와 내용물을 분리 해야 합니다. 이 기사에서는 섭취 한 쓰레기의 분류 및 정량화, GI 내용물을 일곱 가지 다른 종류의 해양 쓰레기와 두 가지 범주의 천연 유물로 분류 하는 방법에 대해 설명 합니다. 섭취 한 쓰레기의 양은 총 건조 질량 (그램에서 두 개의 소수 자릿수)과 풍부 (항목 수)로 보고 되어야 합니다. 이 프로토콜은 좋은 환경 상태 (GES)를 달성 하기 위해 두 가지 가능한 시나리오를 제안 합니다. 첫 번째: “각 하위 지역에서 50-100 죽은 거북이의 샘플에서 GI에 Y g 이상의 플라스틱을 가진 바다 거북의 X% 미만 이어야 한다”, 여기서 Y는 섭취 하는 플라스틱의 평균 무게와 X%는 플라스틱의 더 많은 무게 (그램)와 바다 거북의 비율입니다 Y 보다. 식품을 개별 건강의 프록시로 서 플라스틱에 대 한 것으로 간주 하는 두 번째는 “각 하위 지역에서 50-100 죽은 거북이의 샘플에 식품을 유지 하는 것 보다 더 많은 플라스틱 무게 (그램)를 갖는 바다 거북의 X% 미만이 있어야 합니다”.
해양 쓰레기는 여러 소스와 양식을 통해 바다에 들어갈 수 있기 때문에 해결 해야 할 복잡 한 문제입니다. 해양 환경에서 발생 하는 쓰레기의 80% 이상이 플라스틱1로 이루어져 있습니다. 경제 관점에서이 물질의 역할은 지난 50 년 동안 증가 하고있다. 결과적으로, 그것의 생산은 또한 증가 1960 이후, 3억3500만 톤 2016에 도달. 이 값은 향후 20 년 동안2배가 될 것으로 예상 됩니다. 또한 매년 약 5 ~ 1300만 톤의 플라스틱이 해양에서 끝까지 추정 되 고 있습니다 (이는 전 세계 플라스틱 생산의 1.5에서 4%에 해당). 플라스틱 무브먼트는 부 력과 같은 물리적 성질 또는 환경 변수 (예: 조 수 및 기류)에 의해 영향을 받으며, 플라스틱은 모든 해양 구획4,5에 축적 됩니다. 플라스틱 문제에 직면 하기 위해, 다른 많은 환경 문제, 그것은 국가간 이며 따라서 거 버 넌 스 솔루션을 충족 하기 위해 복잡 하다는 것을 명심 하는 것이 중요 하다6. 이 목표를 달성 하기 위해 우리는 지역 및 국제 프레임 워크를 고려 하 여 해양 환경 인식 및 보호를 강화 하거나 유지 하기 위해 전 세계7. 유럽 연합의 해양 전략 프레임 워크 지침 (MSFD)의 최종 목적은 해양 생물 다양성을 보호 하 고 해양 환경의 지속 가능한 사용을 촉진 하기 위해 2020에 의해 유럽의 바다에서 좋은 환경 상태 (GES)를 달성 하는 것입니다. 이는 디스크립터 10이 해양 쓰레기에 초점을 맞추고 “해양 쓰레기의 특성과 양이 해안 및 해양 환경에 해를 끼 치 지 않는 것”으로 정의 된 11 가지 질적 설명자를 통해 수행 됩니다. 이 디스크립터 내에서 새로운 커미션 결정8 은 “해양 동물이 섭취 하는 쓰레기와 미세 쓰레기의 양은 관련 종의 건강에 악영향을 미치지 않는 수준에 D10C3” 기준을 추가 하기로 결정 했습니다. 는 GES의 평가에서 관련 기준으로 간주 됩니다. 그 결과, 회원국 들의 목록을 작성 하 고, 방법론 표준을 개발 하 고, 지역 또는 부 지역 협력을 통해 임계 값을 정의 하도록 요청 받았다.
18389에서 첫 번째 과학 간행물 후, 섭취 한 촛불 스틱을 사용 하 여 폭풍 petrel에, 500 해양 종 섭취 해양 쓰레기10,11,12,13에 대 한 나열 되었습니다. ,14및 바다거북은 플라스틱 파편 (15)을 섭취 하기 위해 기록 된 최초의 타사 중 하나 였다. 쓰레기를 섭취 하는 성향을 감안할 때, 그들의 넓은 분포와 그들의 생활 동안 사용 되는 서식 지의 넓은 범위, 바다 거북, 특히 붉은 종 카레 타 카레 (linnaeus 1758),에 대 한 잠재적인 지표로 선택 되었다 지중해 유역16, 북부 유럽 물17에 대 한 바다 조류 풀 marus 빙하 (linnaeus, 1761) 처럼. 연구의 5 년 후에도, 방법 표준화의 논의는 매우 제한적18 및 야생 동물에의 한 플라스틱 섭취를 정량화 하는 과학적인 공동체에의 한 응집력 있는 접근19가 결여 되어 있다. 해양 생물군에의 한 플라스틱 섭취를 평가 하기 위한 표준화 된 샘플링 프로토콜 및 분석 탐지 방법 및 지표가 필요 합니다. 최근의 논문은 해양 생물을 플라스틱 오염20에 대 한 바이오 지표로 사용 하는 것에 대 한 잠재적 이익과 한계점을 보여주었다. 201121 에서의 matiddi 외 제안서에 따라로 거 헤드를 바이오 지표로 사용 하 고, 해양 쓰레기 보고서 (22)의 기술 그룹에는 바다 거북에 의해 섭취 되는 해양 쓰레기를 고려 하는 구체적인 프로토콜이 개발 및 테스트 되었습니다. 유럽 프로젝트 내에서 지중해와 대서양에 있는 7 개국에서 10 명의 파트너 들이 기소 된 것입니다. C2). 이 프로토콜은 새로운 커미션 결정을 지원 하기 위해 바다거북에 의해 섭취 되는 해양 쓰레기의 분석을 위한 표준화 된 방법론을 제공 합니다 (EU)8, 기준 D10C3, 임계 값이 요구 되는 경우. COM8에서 제공 하는 정의에 따르면, 임계값은 품질 수준 기준이 달성 되었는지 평가할 수 있는 숫자 또는 범위 이므로, GES를 평가 하는 데 도움을 줍니다. 바다 거북에 의해 수집 된 쓰레기를 평가 하기 위한 제안 된 프로토콜은 구성 및 쓰레기의 풍요로 움에 대 한 데이터를 수집 하 고 해양 환경에 미치는 영향을 평가 하는 데 유용 할 것입니다. 또한 이러한 유형의 표준화 된 데이터를 수집 하면 임계값을 정의 하는 데 도움이 됩니다. 여기서는 두 가지 유형의 시나리오를 살펴보겠습니다. 첫 번째 시나리오는 오 스파 영역에 대해 구현 되는 fulmar 쓰레기 ecoqo 모니터링을 고려 합니다: “각 하위 지역에서 50-100 죽은 거북이의 샘플에서 GI에 y g 이상의 플라스틱을 가진 바다 거북의 X% 미만 이어야 합니다, 여기서 y는 괜찮아요 모든 샘플과 X%를 고려 하 여 섭취 한 플라스틱의 무게는 Y 보다 플라스틱의 무게 (그램)가 더 많은 바다 거북의 비율입니다. 두 번째는 개별 건강 수준의 프록시를 고려 하는 것을 목표로 합니다: “각 하위 지역에서 50-100 죽은 거북이의 샘플에 식품에 남아 있는 음식 보다 플라스틱의 무게를 더 많이 가진 바다 거북의 X% 미만 이어야 합니다”, 섭취 한 무게 플라스틱은 각 개인에 남아 있는 음식과 비교 됩니다.
이 프로토콜은 해양 쓰레기의 총량을 평가 하 고, 바다거북에 의해 섭취 되는 주요 쓰레기 카테고리의 식별을 할 수 있습니다. 바다 거북은 해변에서 좌초 또는 어 부에 의해 복구 된 후에 수집 될 수 있기 때문에 해양 활동과 다른 모니터링 프로그램에 비해 저렴 합니다. 항목 크기에 대 한 하한값은 1mm 이므로 해양 쓰레기 카테고리의 식별은 쉽고 빠릅니다. 프로토콜의 제한은 바다 거북의 사용은 모든 7 종의 해양 거북이는 야생 동식물의 멸종 위기 종에서 국제 무역 협약의 부록 I에 나열 된 것을 고려 하 여27; 따라서 허가 받은 사람만이 살아 있고 죽은 동물이 나 그 일부를 다룰 수 있습니다. 거북이 관리 및 복구는 해당 당국에 보고 하 고 조정 해야 합니다. 죽은 또는 살아있는 야생 동물을 처리 할 때 zoonosis의 위험을 최소화 하기 위해 위생 예방 조치를 취해야 합니다. 이 프로토콜은 붉은 종에서 테스트 되었지만 모든 일곱 거북이 종에 적용 할 수 있다. 데이터 분석은 각 종에 대해 개별적으로 수행 되어야 한다. 살아있는 것에서 미 라 화 된 거북이까지 5 단계에서 고려 된 시 편의 신체 상태. 레벨 1 (Alive)은 회복 후 구조 센터에서 거북이를 죽 였을 경우 시 편의 신체 상태를 보다 세부적으로 분류 하는 것으로 간주 됩니다. 이 프로토콜은 2 단계에서 4 레벨 까지의 죽은 개인에 게 적용 되지만 복구 후 사망 한 개인 (상황: 복구 센터에서 죽은 사람)에도 적용할 수 있습니다. 레벨 2와 3은 프로토콜에 적합 한 반면 레벨 4는 생체 인식 데이터를 측정 하 고 발생 빈도 (FO%) 및 수집 된 해양 쓰레기를 섭취 한 거북의 비율을 평가 하기 위해 섭취 한 쓰레기의 유무를 평가할 수 있습니다. 전체 샘플. 수준 5의 개인, 일반적으로 위장 콘텐츠를 잃은 경우 수집 및 쓰레기 섭취의 정량화에 대 한 고려할 수 없습니다. 취급 하기 전에 동물의 사진을 찍을 때, 사망 또는 주요 부상 및 얽 힘의 가능한 원인으로 샘플에 대 한 추가 정보를 제공 할 수 있습니다. 그림에 눈금 막대를 포함 하는 것이 중요 합니다. 자주 바다거북이 기에 낚 싯 대가 있는 경우에도 긴 선 피해자가 적극적으로 포획 된 낚시 고리가 “해양 쓰레기”로 간주 되지 않기 때문에 데이터를 분석에 포함 하지 않아도 됩니다. 후크 존재는 노트에 기록해 야 합니다. Gi 막힘 또는 배변을 통해 제거 할 수 있는 능력을 고려 하 여 해양 쓰레기 섭취에 대 한 내성의 정도를 평가 하기 위해 GI (식도, 위, 내장)의 각 부분에서 데이터 수집을 별도로 수행 해야 합니다. 이전 연구에서 입증 된16,28,29,3132. 프로토콜의 중요 한 단계는 항목 수의 컬렉션에서 찾을 수 있습니다. 여러 조각은 GI 내부의 동일한 오브젝트의 단편화 또는 별도의 수집의 결과로 도출 될 수 있습니다. 단일 항목 또는 여러 개의 개별 조각에 대 한 주관적인 해석은 기록 번호의 잠재적 편향에 해당할 수 있습니다 (그림 6). 이 때문에, 임계 값은 풀 마 ecoqo17,25와 같은 수집 된 해양 쓰레기 질량 데이터만을 사용 하 여 정교 하 게 되었습니다.
그림 6 : 단일 항목의 조각화가 섭취 전에 또는 먹이 주기 중에 발생할 수 있으며,이로 인해 편향이 계산 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
이 프로토콜은 모양에 따라 다양 한 플라스틱 항목을 범주화 해야 합니다 (그녀 사용, THR 사용). 이 서브 디비전은 그들의 풍요로 움에 따라 항목의 목록을 가진 해양 쓰레기의 소스를 식별 하는 데 유용 합니다. 그것은 그들의 힘을 평가 하 여 항목을 대상으로 그들의 효율성의 빠른 증거를 제공 하는 조치의 그들의 프로그램에 보조 정책 제작자. 예를 들어, 시장에서 비닐 봉지를 금지 하는 것은 미래에 수집 된 바다 거북 표본에서 그녀가 섭취 한 범주 (그림 4, 그림 5)의 감소와 일치 해야 합니다. 이 프로토콜을 적용 하면 EU 회원국 들이 MSFD 요구 사항에 응답 하 고 자체 기준선을 평가 하 고 GES가 달성 되는 임계값을 정의할 수 있습니다. 임계값은 깨끗 하거나 깨끗 한 영역 옆에서 결정 되어야 합니다. 해양 환경에서 플라스틱의 유비 인해 깨끗 한 영역이 존재 하지 않습니다. 상기 실시 예의 데이터 (표 1)에 따르면, 영역 5는 지중해 분 지에 도달 하는 값 (Y)을 나타낼 수 있는 가장 명확한 영역 이었다. 회원국은이 값에서 자신의 거리의 현저한 감소에 따라 임계치를 결정 한다. 최근의 리뷰 (18)에 따르면, 해양 쓰레기 섭취 유닛은 특히 목표가 상이한 연령대 클래스를 비교 하는 경우, 거북이의 크기로 정규화 되어야 한다. 그럼에도 불구 하 고, 섭취 한 쓰레기와 거북이 크기의 질량 사이의 관계는 양수, 음수 또는 0 값을 가진 다른 저자에 의해 감지 되었습니다16,26,32,33 34. 우리의 프로토콜은 첫 번째 시나리오에서 동물의 크기를 포함 하지 않지만, 곡선의 갑 피 길이 (CCL)35 를 사용 하 여 거북의 질량을 평가 하 고 신체의 부담을 추정 하는 것이 가능 하 고 대신에만 거북의 플라스틱 무게의 비율을 사용 하 여 섭취 한 플라스틱 (Y)의 그램. 어떤 경우에는 샘플16,26을 더 잘 만족시 키 기 위해, 성인이 된 거북이를 neritic 사람 또는 조기 청소년과 병합 하기 전에 가능한 중요 한 차이를 확인 하는 것이 좋습니다. 두 번째 시나리오는 개별 건강 상태와 더 관련이 있으며 D10C3 기준에 더 잘 응답할 수 있습니다. “해양 동물이 섭취 한 쓰레기와 미세 쓰레기의 양은 종의 건강에 악영향을 미치지 않는 수준입니다. “. 실제로, 섭취 한 플라스틱 제품의 영향은 치명적인 효과 보다는 치명적 영향으로 가장 빈번 하 게 구성 됩니다28,36,37,38,39. 우리는 또한 거의 거북의 죽음을 일으킬 수 있는 플라스틱 섭취로 인 한 폐색 또는 천공을 발견 하지 않았습니다. 하위 치명적인 효과는 검출 하기 쉽지 않으며 다른 오염 물질40으로 인 한 충격 으로부터 구별 될 수 있습니다. 식품 희석 또는 오염 물질의 동화는 해양 쓰레기가 거북이41의 GI 내부에 있을 때 발생 합니다. 따라서 식품 보다 더 많은 그램의 플라스틱이 있는 샘플은 매우 나쁜 건강 상태에서 동물을 나타낼 수 있습니다. 북부 유럽 국가에서 사용 하는 fulmar ecoqo17 과 함께 유지 하기 위해 두 시나리오 모두 해양 쓰레기 무게 대신 플라스틱 중량을 고려 합니다.
마지막으로 (i) 인구 보존에 대 한 결과 인구에 미치는 영향의 지표로 바다 거북에 플라스틱의 섭취를 분석 (i)의 차이를 명확히 하는 것이 중요 하다으로 바다 거북에 플라스틱의 섭취를 분석 해안 및 해양 환경에 미치는 영향의 바이오 인디케이터20,40. 거북이 인구의 보존에 미치는 영향을 이해 하려면 더 많은 정보가 필요 하며 더 나은 데이터 계층화가 필요 합니다42. 바다 거북 생물학 및 보존의 전문가 인 13 개국에서 35 전문가의 의견에 직면 하 여, 그것은 바다 거북이 널리 연구 된 것이 분명 하다 수 년에 걸쳐, 그것은 여전히 인간의 상호 작용을 조사 하는 것이 필요 하지만 하 여 인구 상태 및 잠재적인 위협43을 평가 합니다.
이것은 단일 프로토콜이 모든 주제에 대 한 포괄적으로 간주 될 수 없다는 것을 의미 하 고 더 많은 연구가 인구 수준에서 플라스틱의 영향을 이해 하는 것이 필요 하다.
심지어 힘든 플라스틱은-캐치 또는 서식 지 파괴에 대해, 바다 거북 손상의 낮은 수준을 야기 하는 것으로 간주 될 수 있다, 그 감소는 지난 몇 년 동안 도전적 이었고, 측정의 빠른 방법은 정교 해야 합니다. 일부 저자에 따르면 그들은 전체 인구40의 대표 하지 않기 때문에 모니터링 목적을 위해 좌초 거북이의 사용에 논란이 있다, 다른 사람은 좌초 거북이는 해양 편견을 나타내지 않는 것을 선언 하는 동안 백그라운드 인구의 쓰레기 수집 속도44. 더욱이, 많은 나라에서 잘 조직 된 좌초 네트워크 또는 어 부에 구조 센터를 연결 하는 시스템 및 수 산업에 의해 캐치 및 사후 방출에 대 한 정보의 부족이 있다. 따라서, 좌초 샘플은 죽어 해변에 도달 하기 전에 시간 기간 동안 정상적인 먹이 행동 없이 아픈 거북이로 간주 될 수 없습니다; 그들 중 대부분은 “바다에서 죽음” 거북이 세척 상륙 일반적으로 모니터링 활동26,32,38,45의 샘플로 사용 됩니다. 우리는 좌초 샘플이 환경에서 해양 쓰레기 풍부의 수준에 대 한 정보를 제공 하는 데 유용 하다 고 생각 하 고 우리는 그들이 오랫동안 아픈 수 있는이 분석에서 완전히 빈 위 장관으로 거북이만 제외 하는 것이 좋습니다 죽음 이전의 시간. 이 프로토콜의 사용은 해양 생물에 대 한 환경 상태 및 해양 쓰레기 가용성의 평가를 가능 하 게 할 것 이다. 그것은 또한 거북이 행동에 대 한 우리의 지식을 향상에 도움이 될 수 있습니다. MSFD는 TS-ML 가이드라인 (22)에 대하여 방법의 중요성은 7 개국에서의 조화 및 시험 된 샘플의 수 (n=700)에 기인한 다. 샘플의 신체 상태 수준이 정의 되 고 해양 쓰레기 섭취 범주가 예비 결과에 따라 감소 되었습니다. 또한, 이것은 처음으로 대표자 결과가 표시 되 고 GES 임계값에 연결 되었습니다.
이 프로토콜은 전 세계적으로 또는 현지 규모로 플라스틱이 해양 환경에 미치는 영향을 이해 하 고 표준화 된 데이터를 이웃 국가와 비교 하기 위한 효율적인 도구입니다. 다른 국가 간의 데이터 불일치로 인해이 결과에 도달 하지 못하면 공간 비교가 방지 됩니다.
The authors have nothing to disclose.
저자는 프랑스 구조 센터 (장 바티스타 세 뇨 스), 좌초 네트워크 (자크 사키) 및 수 의사 실험실 (조 앤 벨 포트) 및 예수회의 마틴과 마리 사 프라 트, 세타와 바다 거북은 발렌시아의 네트워크에 감사 합니다 카발 리 니 연구소 (발렌시아 대학교)의 해양 Zoo스학 단위를 비롯 하 여, 이탈리아의 구조 였던 아조레스 (마리아 베일)의 과학 기술에 대 한 포르투갈 지역 기금 발렌시아 나의 생물 다양성 서비스를 포함 한 커뮤니티 센터 (밀라노 ‘ 안톤도 른 카 ‘, 나폴리와 사르디 니 아 크레스) 병원의 실험실 테라 모; 이즈 g. Otistano 피 … 이 스 크 레 탐 팔레르모), 기소 IT 자문 위원회의 구성원 및 그들의 제안에 대 한 PO, 그리고 환경 부처 및 지원에 대 한 참가자 국가의 지역 정부.
그들의 제안과 의견에 대 한 두 개의 익명 검토자.
본 프로토콜은 유럽 DG-ENV 프로젝트 GA 11.0661/748064/SUB/ENV 프레임에서 컨소시엄을 기소 하 여 수행 되었습니다. C2.
For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
Boots | |||
Bottle/ziploc bags | |||
Camera | |||
Cooler | |||
Cut-resistant gloves | |||
Garbage bag | |||
Glasses and protective mask or shield | |||
Gloves | |||
Integral protective suit | |||
Measuring tape | |||
Observation sheet | |||
Pen | |||
Permanent marker | |||
Rope (to marke-off the zone) | |||
Transport bins or containers for the turtle | |||
For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
In the laboratory room | |||
Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
Garbage bags | |||
Proofer (not mandatory) | |||
For manipulators | |||
Boots | |||
Cut-resistant gloves | |||
Glasses and protective mask or shield | |||
Gloves | |||
Integral protective suit | |||
For notes and report | |||
Camera | |||
Observation sheet | |||
Pen | |||
Permanent marker | |||
For biometric measurements | |||
Measuring tape | |||
Sliding calliper | |||
For the necropsy and the collection of samples | |||
Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
Clips with claws | |||
Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
Metal containers | |||
Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
Scissors | |||
For the analysis of ingested litter | |||
Binocular (optional) | |||
Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
Measuring decimetre | |||
Precision balance (0.01 g) | |||
Sieve with 1 mm mesh | |||
Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |