هذه الرسالة يقدم بيانات عن دقة واستنساخ من معمل للأشعة فوق البنفسجية VIS BioSpec النانو لdsDNA الكميات والبروتين. حتى مع كميات صغيرة جدا (من 1 إلى 2 لتر) ، واستنساخ ممتازة ، في حين أن وظيفة المسح الآلي يحسن الإنتاجية والحد الأدنى من النتائج في المرحل عن نتائج أكثر دقة.
تقدمت إجراءات الكميات حمض النووي بشكل ملحوظ في العقود الثلاثة الماضية. أكثر وأكثر ، ويتفق علماء البيولوجيا الجزيئية تتطلب صغيرة الحجم تحليل عينات الحمض النووي لتجاربهم. وBioSpec نانو يوفر حلا محتملا للمشاكل غير دقيقة النتائج غير استنساخه ، الكامنة في الأساليب الحالية الكميات الحمض النووي ، عبر البصريات والمتخصصة للكشف عن حساسية PDA. وBioSpec النانو وأيضا وظيفة مثل هذه الآلية التي تتم تصاعد مستمر ، والقياس ، والتنظيف في الصك ، وبالتالي القضاء على تنسيب شاقة ، والمتكررة ، وغير متناسقة من عنصر والألياف البصرية والتنظيف اليدوي.
في هذه الدراسة ، يقدم بيانات عن الكمي من الحمض النووي والبروتينات ، فضلا عن استنساخ القياس ودقتها. الاتصال الآلي عينة المسح السريع ويسمح القياس في ثلاث ثوان ، مما أدى إلى سرعة ممتازة. ويتم تحليل البيانات خارج باستخدام الميزات المضمنة في البرنامج. الصيغة المستخدمة لحساب تركيز الحمض النووي هو :
عينة تركيز = DF · (OD260 – OD320) · NACF (1)
حيث DF = عامل تخفيف العينة وNACF = تركيز حمض النووي عامل.
تم تعيين تركيز الأحماض النووية عامل وفقا لتحليلها المختارة 1.
ويمكن التعبير عن النتائج تركيز البروتين كما ميكروغرام / مل أو الشامات / L عن طريق إدخال القيم وE280 الوزن الجزيئي على التوالي. عندما يتم إدخال القيم لبقايا صور ، والتربتوفان سيستين (SS السندات) في التبويب e280Calc ، يتم حساب قيم معامل الانقراض كما E280 = 5500 × (بقايا التربتوفان) + 1490 × (بقايا صور) + 125 × (SS السندات السيستين) . يتم استخدام القيمة E280 بواسطة برنامج لحساب التركيز.
بالإضافة إلى تحديد تركيز الأحماض النووية والبروتين ، ويمكن استخدام BioSpec نانو باعتبارها معمل الصغيرة الحجم جدا لanalytes أخرى كثيرة أو على شكل معمل قياسي باستخدام الخلايا طول المسار 5 ملم.
فقد تم تصميم BioSpec نانو لحل القضايا الراهنة المتأصلة في أساليب الكميات الحمض النووي ، مثل نتائج غير متناسقة ومملة العمل اليدوي. كل قياس يأخذ 3 ثوان فقط ، مما يسمح للعالم البيولوجيا الجزيئية من ذوي الخبرة لتحليل عينات متعددة حول 3-6 في دقيقة واحدة. ميزة فريدة من نوعها ليس فقط ممسحة يحسن الإنتاجية للقياس ، وأنه يقضي أيضا على الحاجة إلى التنظيف اليدوي من الركائز ، مما أدى إلى المرحل ضئيلة بين القياسات. وعلاوة على ذلك ، أشارت الاختبارات فقط باستخدام مناديل 2 لعينات من الحمض النووي يحتوي على 1000 نانوغرام / ميكرولتر ، المرحل أقل من 2 نانوغرام / ميكرولتر.
توافر خلية 5 ملم طول المسار يوفر خيارا لتحليل الحمض النووي وعينات من البروتين المخفف ويمتد استخدام هذه الأداة في التطبيقات الأخرى.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Tip | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
BioSpec-nano | Shimadzu | |||
Calf Thymus DNA | Sigma Aldrich | |||
Bovine Serum Albumin | Sigma Aldrich |