Экспериментальные метастазы и CTL Приемные Передача Иммунотерапия мышиной модели
Özet
Экспериментальные метастазы легких и CTL модель мыши иммунотерапии для анализа опухолевых клеток-Т-клеток взаимодействия<em> В естественных условиях</em>.
Abstract
Экспериментальная модель мыши метастазов является простой, но физиологически соответствующих метастазы модели. Опухолевые клетки вводят внутривенно (IV) в вены хвоста мыши и колонизировать в легкие, тем самым, напоминающие последних этапах опухолевой клетки спонтанного метастазирования: выживание в обращении, экстравазации и колонизации в дистальных отделах органов. С терапевтической точки зрения, экспериментальная модель метастазов является самым простым и идеальной модели с целью лечения часто конечная точка метастазы: созданы метастатической опухоли в дистальных отделах органа. В этой модели, опухолевые клетки вводятся IV в вены хвоста мыши и позволил, чтобы колонизировать и расти в легких. Опухоль конкретных ЦТЛ затем вводят в IV метастазы несущих мыши. Количество и размеры метастазов в легких может контролироваться количество опухолевых клеток, который будет введен и время роста опухоли. Таким образом, различные стадии метастазирования, от минимального к обширным метастазированием метастазы, могут быть смоделированы. Метастазов в легких анализируются инфляции с чернилами, что позволяет легче визуального наблюдения и количественной оценки.
Protocol
Açıklamalar
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Поддержке грантов от Национального института здоровья (CA133085 в КЛ) и Американского онкологического общества (RSG-09-209-01-ТБГ в КЛ).
Materials
Solutions:
India Ink Solution (17):
- Pour 150 ml of distilled water into a 250 ml flask.
- Add 4 drops ammonium hydroxide to the distilled water.
- Add 30 ml India Ink stock (i.e. Sanford Black Magic Waterproof Drawing Ink 4465 Item 44011) to the ammonia and water mixture.
- Top off with distilled water to a volume of 200 ml. Solution is ready for injection.
Fekete’s Solution (17):
Fekete’s solution is used to bleach India ink-inflated tumor-bearing lungs to distinguish white tumor nodules from the black background of normal tissues.
- Add 350ml 95% EtOH to 1L glass bottle.
- Add 150ml distilled water
- Add 50ml formaldehyde
- Add 25ml glacial acidic acid
Referanslar
- Ryan, M. H., Bristol, J. A., McDuffie, E., Abrams, S. I. Regression of extensive pulmonary metastases in mice by adoptive transfer of antigen-specific CD8(+) CTL reactive against tumor cells expressing a naturally occurring rejection epitope. J Immunol. 167 (8), 4286-4292 (2001).
- Caldwell, S. A., Ryan, M. H., McDuffie, E., Abrams, S. I. The Fas/Fas ligand pathway is important for optimal tumor regression in a mouse model of CTL adoptive immunotherapy of experimental CMS4 lung metastases. J Immunol. 171 (5), 2402-2412 (2003).
- Liu, K., Caldwell, S. A., Greeneltch, K. M., Yang, D., Abrams, S. I. CTL Adoptive Immunotherapy Concurrently Mediates Tumor Regression and Tumor Escape. J Immunol. 176 (6), 3374-3382 (2006).
- Yang, D., Stewart, T. J., Smith, K. K., Georgi, D., Abrams, S. I., Liu, K. Downregulation of IFN-gammaR in association with loss of Fas function is linked to tumor progression. International journal of cancer. 122 (2), 350-362 (2008).
- Pages, F., Berger, A., Camus, M. Effector memory T cells, early metastasis, and survival in colorectal cancer. N Engl J Med. 353 (25), 2654-2666 (2005).
- Galon, J., Costes, A., Sanchez-Cabo, F. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome. Science. 313 (5795), 1960-194 (2006).
- Strater, J., Hinz, U., Hasel, C. Impaired CD95 expression predisposes for recurrence in curatively resected colon carcinoma: clinical evidence for immunoselection and CD95L mediated control of minimal residual disease. Gut. 54 (5), 661-665 (2005).
- Camus, M., Tosolini, M., Mlecnik, B. Coordination of intratumoral immune reaction and human colorectal cancer recurrence. Cancer research. 69 (6), 2685-2693 (2009).
- Dudley, M. E., Wunderlich, J. R., Yang, J. C. Adoptive cell transfer therapy following non-myeloablative but lymphodepleting chemotherapy for the treatment of patients with refractory metastatic melanoma. J Clin Oncol. 23 (10), 2346-2357 (2005).
- Srivastava, M. K., Sinha, P., Clements, V. K., Rodriguez, P., Ostrand-Rosenberg, S. Myeloid-derived suppressor cells inhibit T-cell activation by depleting cystine and cysteine. Cancer research. 70 (1), 68-77 (2010).
- Nagaraj, S., Gabrilovich, D. I. Tumor escape mechanism governed by myeloid-derived suppressor cells. Cancer research. 68 (8), 2561-2563 (2008).
- Nguyen, D. X., Bos, P. D., Massague, J. Metastasis: from dissemination to organ-specific colonization. Nature reviews. 9 (4), 274-284 (2009).
- Heijstek, M. W., Kranenburg, O., Rinkes, B. o. r. e. l., H, I. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Digestive surgery. 22 (1-2), 1-2 (2005).
- Yang, D., Ud Din, N., Browning, D. D., Abrams, S. I., Liu, K. Targeting lymphotoxin beta receptor with tumor-specific T lymphocytes for tumor regression. Clin Cancer Res. 13 (17), 5202-5210 (2007).
- Yang, D., Thangaraju, M., Browning, D. D. IFN Regulatory Factor 8 Mediates Apoptosis in Nonhemopoietic Tumor Cells via Regulation of Fas Expression. J Immunol. 179 (7), 4775-4782 (2007).
- Yang, D., Thangaraju, M., Greeneltch, K. Repression of IFN regulatory factor 8 by DNA methylation is a molecular determinant of apoptotic resistance and metastatic phenotype in metastatic tumor cells. Cancer research. 67 (7), 3301-3309 (2007).
- Wexler, H. Accurate identification of experimental pulmonary metastases. Journal of the National Cancer Institute. 36 (4), 641-645 (1966).
