드로소필라 광유전학: 신경 회로를 조작하는 방법
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: 드 브리스, S. E., 클랜딘, 드로소필라 멜라노가스터에서탈출 행동의T. Optogenetic 자극 . J. 비스 익스펙. (2013).
광유전학은 빛의 활성화가 뉴런의 상태에 있는 변경을 트리거하는 특정 opsins-빛 에 민감한 단백질을 표현하기 위하여 유전으로 조작된 신경을 조작하기 위하여 빛의 사용을 가능하게 합니다. 여기에서 우리는 opsin Channelrhodopsin2를 사용하여 Drosophila에 있는 optogenetic 접근을 기술합니다. 예제 프로토콜은 비행의 탈출 행동 뒤에 신경 회로를 연구하기 위하여 설정된 광유전학 분석체를 특징으로 합니다.
Protocol
이 프로토콜은 드 브리스와 클란딘에서 발췌, 드로소필라 멜라노가스터에서탈출 행동의 Optogenetic 자극,J. Vis. Exp. (2013). 1. 채널로도프신 파리 생성 크로스 UAS-ChR2 는 당신의 선택의 Gal4 드라이버와 비행, 우리는 G105-Gal4를 사용, 이는 광학 엽에서 포마-1 뉴런에서 표현된다. 청색광 자극에 대한 시각적 반응의 가능성을 제거하기 위해 두 플라이 라인?…
Representative Results
그림 1: 수직 홀더와 LED 어레이가 부착된 방열판을 들고 있는 4개의 냉각수 호스 링 암이 있는 플랫폼을 보여주는 실험적인 설정입니다. (A)주변 조명 아래 설정. (B)LED가 켜지면 설정합니다. (C)방열판에 트라이 스타 LED의 클로즈업 보기. (D)트라이 렌즈가 부착된 트라이스?…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
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Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).