Summary

Determinación de la absorción, translocación y distribución de imidacloprid en trigo

Published: April 28, 2023
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Summary

Aquí se presenta un protocolo para la determinación de la absorción, translocación y distribución de imidacloprid en trigo en condiciones hidropónicas utilizando cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS-MS). Los resultados mostraron que el imidacloprid puede ser absorbido por el trigo, y el imidacloprid se detectó tanto en las raíces como en las hojas del trigo.

Abstract

Los neonicotinoides, una clase de insecticidas, son ampliamente utilizados debido a sus nuevos modos de acción, alta actividad insecticida y fuerte absorción de raíces. El imidacloprid, el insecticida más utilizado en todo el mundo, es un neonicotinoide representativo de primera generación y se utiliza en el control de plagas para cultivos, hortalizas y árboles frutales. Con una aplicación tan amplia de imidacloprid, su residuo en los cultivos ha atraído un escrutinio cada vez mayor. En el presente estudio, 15 plántulas de trigo se colocaron en un medio de cultivo que contenía 0,5 mg / L o 5 mg / L de imidacloprid para hidrocultivo. El contenido de imidacloprid en las raíces y hojas de trigo se determinó después de 1 día, 2 días y 3 días de hidrocultivo para explorar la migración y distribución de imidacloprid en el trigo. Los resultados mostraron que el imidacloprid se detectó tanto en las raíces como en las hojas de la planta de trigo, y el contenido de imidacloprid en las raíces fue mayor que en las hojas. Además, la concentración de imidacloprid en el trigo aumentó con el aumento del tiempo de exposición. Después de 3 días de exposición, las raíces y hojas del trigo en el grupo de tratamiento de 0,5 mg/L contenían 4,55 mg/kg ± 1,45 mg/kg y 1,30 mg/kg ± 0,08 mg/kg de imidacloprid, respectivamente, mientras que las raíces y hojas del grupo de tratamiento de 5 mg/L contenían 42,5 mg/kg ± 0,62 mg/kg y 8,71 mg/kg ± 0,14 mg/kg de imidacloprid, respectivamente. Los resultados del presente estudio permiten una mejor comprensión de los residuos de plaguicidas en los cultivos y proporcionan una referencia de datos para la evaluación del riesgo ambiental de los plaguicidas.

Introduction

En la agronomía actual, el uso de pesticidas es esencial para aumentar el rendimiento de los cultivos. Los insecticidas neonicotinoides alteran el equilibrio del potencial de membrana al controlar los receptores nicotínicos de acetilcolina en el sistema nervioso del insecto, inhibiendo así la conducción normal del sistema nervioso central del insecto, lo que lleva a la parálisis y muerte de los insectos1. En comparación con los insecticidas tradicionales, los neonicotinoides tienen ventajas tales como nuevos modos de acción, alta actividad insecticida y fuerte absorción de raíces, lo que los hace altamente exitosos en el mercado de plaguicidas 2,3. Se informó que el volumen de ventas de neonicotinoides representó el 27% del mercado mundial de pesticidas en 2014. La tasa de crecimiento anual promedio de los neonicotinoides fue del 11,4% de 2005 a 2010, de los cuales alrededor del 7% se registró en China 4,5,6. Desde finales de 2016 hasta el primer semestre de 2017, las ventas de plaguicidas en China comenzaron a repuntar después de caer, y los precios de los plaguicidas continuaron aumentando, entre los cuales los insecticidas neonicotinoides mostraron un aumento significativo de precios7. Hasta ahora, se han desarrollado tres generaciones de insecticidas neonicotinoides, cada uno con cloruro de piridina, tiazolilo y grupos tetrahidrofuranos de nicotina, respectivamente8.

El imidacloprid representa la primera generación de insecticidas neonicotinoides, cuya fórmula molecular esC9H10ClN5O2, y es un cristal incoloro. El imidacloprid se utiliza principalmente para controlar plagas, como pulgones, saltamontes, gusanos de la harina y trips9 y se puede aplicar a cultivos como arroz, trigo, maíz, algodón y hortalizas como papas, así como árboles frutales. Debido a la aplicación a largo plazo, sustancial y continua de plaguicidas, tanto los insectos beneficiosos como los enemigos naturales de las plagas se han reducido rápidamente, y algunas plagas agrícolas se han vuelto resistentes a los plaguicidas, lo que resulta en un círculo vicioso de aplicación continua y creciente de pesticidas10. Además, la aplicación extensiva de plaguicidas ha provocado el deterioro de la calidad del suelo, la persistencia de residuos de plaguicidas en los productos agrícolas y otros problemas ecológicos, que no solo causan daños significativos al medio ambiente ecológico agrícola11 sino que también representan una grave amenaza para la salud humana12. La fumigación con pesticidas afecta gravemente el crecimiento y la calidad de los microbios del suelo y los animales del suelo13. El uso irrazonable o excesivo de plaguicidas ha causado riesgos significativos para la seguridad del medio ambiente del suelo y el agua, los animales y las plantas, e incluso la vida humana14. En los últimos años, el problema de los residuos excesivos de plaguicidas en los cultivos se ha agravado con la aplicación extensiva de plaguicidas. Cuando se utilizó imidacloprid para aumentar el rendimiento vegetal, la tasa de absorción de imidacloprid en los vegetales aumentó con el aumento en la cantidad y el residuo de imidacloprid15. Como cultivo alimentario importante, tanto la producción como la seguridad del trigo son críticas. Por lo tanto, es necesario aclarar las políticas de residuos y distribución de plaguicidas utilizados para el trigo.

En los últimos años, se han desarrollado muchos métodos para extraer residuos de imidacloprid del agua, el suelo y las plantas. El método QuEChERS (rápido, fácil, barato, eficaz, robusto y seguro) es un nuevo método que combina la tecnología de microextracción en fase sólida y la tecnología de extracción en fase sólida dispersa e implica el uso de acetonitrilo como disolvente de extracción y la eliminación de impurezas mixtas y agua en la muestra utilizando NaCl y MgSO anhidro4, respectivamente16. El método QuEChERS requiere un mínimo de cristalería y tiene pasos experimentales simples, lo que lo convierte en uno de los métodos de extracción de pesticidas más populares17. Para la detección de imidacloprid, se ha alcanzado un límite de detección tan bajo como 1 × 10−9 g18 con cromatografía líquida (LC), y 1 × 10−11 g 19 se ha logrado con cromatografía de gases (GC). Debido a su alta resolución y sensibilidad, LC-MS y GC-MS han mostrado límites de detección de imidacloprid aún más bajos de 1 × 10-13 a 1 × 10-14 g20,21; Estas técnicas son, por lo tanto, muy adecuadas para el análisis de trazas de residuos de imidacloprid.

En el presente estudio, el imidacloprid fue elegido como el contaminante objetivo, y el trigo fue seleccionado como el cultivo de prueba para estudiar la distribución de los residuos de imidacloprid en el trigo. Este protocolo detalla un método para el análisis exhaustivo del enriquecimiento y la transferencia del pesticida imidacloprid en el trigo mediante la exploración de la absorción y el almacenamiento de imidacloprid en diferentes partes de las plantas de trigo cultivadas en condiciones hidropónicas. El presente estudio tiene como objetivo proporcionar una base teórica para la evaluación del riesgo de los residuos de plaguicidas en el trigo, guiar la aplicación racional de plaguicidas en las actividades de producción agrícola para reducir los residuos de plaguicidas y mejorar la inocuidad de la producción de cultivos.

Protocol

1. Germinación de semillas de trigo Seleccione 1.000 semillas de trigo (Jimai 20) con gránulos completos, embriones intactos y tamaño uniforme (longitud: 6 mm ± 0,5 mm). Transfiera 333,3 ml de solución de H2O2 al2 al 30% a un matraz aforado de 1 L y diluya con agua desionizada para preparar 1 L de solución deH2O2al10%. Sumerja las semillas de trigo en una solución deH2O2O2 al 10% durante 15 min para desinfectar la superfici…

Representative Results

El límite de detección (LOD) del instrumento de imidacloprid fue de 5,76 × 10−14 g, y el LOD del método de imidacloprid en la raíz u hoja de trigo fue de 0,01 μg/kg; No se observó ningún efecto matricial. Los rendimientos de recuperación de imidacloprid en trigo se muestran en la Tabla 2. Los rendimientos de recuperación de imidacloprid de las raíces de trigo expuestas a concentraciones de imidacloprid de 0,5 mg/L y 5 mg/L fueron 94,0%-97,6% y 98,8%-99,2%, respectivamente; Los coe…

Discussion

En los últimos años, se han notificado con frecuencia métodos para el tratamiento previo y la detección de residuos del plaguicida imidacloprid. Badawy et al.23 utilizaron cromatografía líquida de alta resolución para determinar el contenido de imidacloprid en fruta de tomate cultivada en condiciones de invernadero y reportaron una buena linealidad para imidacloprid en el rango 0,0125-0,15 μg/mL. Zhai et al.24 utilizaron LC-MS-MS para estudiar el residuo de imidaclo…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (No. 42277039).

Materials

Acetonitrile Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. 01-06-1995 Suitable for HPLC, gradient grade, >99.9%
Analytical balance Sartorius Lab Instruments Co.Ltd. GL124-1SCN
Artificial climate incubator   Shanghai Badian Instrument Equipment Co. Ltd. HK320
Centrifuge Eppendorf China Co. Ltd. Centrifuge5804
Disposable syringe Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. Z116866 Capacity 5 mL, graduated 0.2 mL, non-sterile
Formic acid Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. Y0001970 European pharmacopoeia reference standard
Graphitized carbon black (GCB) Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. V900058 45 μm
H2O2 Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd. 31642 30% (w/w)
Hoagland’s Basal Salt Mixture Shanghai Yu Bo Biotech Co. Ltd. NS1011 Anhydrous, reagent grade
Hydroponic equipment Jiangsu Rongcheng Agricultural Science and Technology Development Co.Ltd. SDZ04BD
Hypersil BDS C18 column Thermo Fisher Scientific (China) Co. Ltd. 28103-102130
Imidacloprid Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. Y0002028 European pharmacopoeia reference standard
MgSO4 Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co. Ltd. 208094 Anhydrous, reagent grade, >97%
NaCl Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd. S9888 Reagent grade, 99%
pH meter Shanghai Thunder Magnetic Instrument Factory PHSJ-3F
Phytotron box Harbin Donglian Electronic Technology Co. Ltd. HPG-280B
Pipettes Eppendorf China Co. Ltd. Research plus
Syringe filter Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co.Ltd. SLGV033N Nylon, 0.22 µm pore size, 33 mm, non-sterile
Ultra performance liquid chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry Thermo Fisher Scientific (China) Co. Ltd. UltiMate 3000
TSQ Quantum Access MAX
Vortex mixer Shanghai Yetuo Technology Co. Ltd. Vortex-2
Wheat seed LuKe seed industry Jimai 20

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Cite This Article
Wang, J., Cheng, C., Zhao, C., Wang, L. Determination of the Absorption, Translocation, and Distribution of Imidacloprid in Wheat. J. Vis. Exp. (194), e64741, doi:10.3791/64741 (2023).

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