Summary

Genotyping מהיר של רקמות באמצעות עכבר חלץ-N-Amp רקמות סיגמא של ערכת ה-PCR

Published: January 22, 2008
doi:

Summary

Genotyping המלא של מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, נעשה באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR הערכה.

Abstract

גילוי הגנום של דנ"א באמצעות הגברה PCR וזיהוי על ג'ל electrophoretic היא הדרך הסטנדרטית כי גנוטיפ של דגימת רקמה נקבע. הכנה קונבנציונלי של רקמות עבור ה-DNA PCR מוכנים לעתים קרובות להימשך מספר שעות עד ימים, בהתאם המדגם רקמות. גנוטיפ של המדגם ובכך עשויה להתעכב מספר ימים, אשר אינו אופציה עבור סוגים שונים של ניסויים. כאן אנו מדגימים את genotyping להשלים מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR קיט. ראשית, אנו מדגימים את החילוץ של רבע שעה של ה-DNA מן המדגם רקמות. ואז, אנחנו מדגימים את הזמן האמיתי לקריאה מתוך הגברה PCR של המדגם, המאפשר זיהוי של מדגם חיובית זה להיות מוגבר. יחד, readout מהיר החילוץ בזמן אמת לאפשר זיהוי מהיר של גנוטיפ של מגוון סוגים שונים של רקמות באמצעות שיטת ה-PCR של אמין.

Protocol

אנא לחץ כאן כדי לראות את הפרוטוקול.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Material Name Type Company Catalog Number Comment
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

Play Video

Cite This Article
Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma’s Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

View Video