Summary

מודל פרכת העכבר הסחת דעת

Published: November 14, 2018
doi:

Summary

אנו מציגים מודל פרכת הסחת דעת הטיביאלי העכבר פותח באמצעות של distractor בהזמנה אישית. השימוש של עכבר בתור מטרה ניתוח הוא יתרון לקידום המחקר.

Abstract

הארכת עצמות (DO) היא הליך כירורגי הכרוך התחדשות רקמות השלד ללא השתלת תא. מודל דו מורכב מהפעולות הבאות שלושה שלבים: שלב החביון לאחר osteotomy והמיקום של distractor חיצוניים; שלב הסחת דעת, שבו קצות העצם מופרדים בהדרגה ובאופן רצוף ודעתם מוסחת; שלב איחוד. זה distractor בהזמנה אישית משמש לעשות מורכבת שתי טבעות לא שלמה שרף אקרילי של בורג הרחבה. התהליך היה ביוזמת ללקיחת תבנית סיליקון הרושם החומר ולאחר מכן יצירת את distractor בהזמנה אישית. שרף שיניים נשפך לתוך טפסות עשוי מחומר סיליקון רושם, זה לא הותר פולימריזציה ליצירת הטבעות לא שלמה שרף הדרושות את distractor בהזמנה אישית. טבעות אלו היו קבוע עם בורג הרחבה באמצעות שרף שקוף. Distractor בהזמנה אישית שנוצרו באמצעות גישה זו צורפה עצם השוקה של עכברים. עצם השוקה היה קבוע להתקן באמצעות זוג אחד של 25 גרם מחטים הציר הקרוב, זוג אחד של מחטים 27 G. רחוק, שרף אקרילי. לאחר תקופה זמן השהיה של 5 ימים, הסחת הדעת היה יזם בשיעור של 0.2 מ מ/12 שעות. הארכת המשיך במשך 8 ימים, נוצר פער מוחלט של 3.2 מ מ. העכברים הוקרבו 4 שבועות לאחר הסחת דעת. היווצרות העצם בנקיק הסחת דעת אושר באמצעות רדיוגרפיה והן היסטולוגיה.

Introduction

הארכת עצמות (DO) היא שיטת טיפול הוקמה עבור מגוון רחב של הפרעות השלד, כגון אי-התאמות אורך האיבר, עצם פגמים איבר מומים1. אסטרטגיית טיפול ייחודי זה מבוסס על “עקרון מתח-מתח” המוצע על ידי מרפי. השיטה דורשת מספר ימים השהיה, מספר שבועות עבור active הסחת דעת של מספר חודשים עבור איחוד עד העצם בוגר הוא בנוי2.

התנאים ובשפתיים המקומי עקב חסימה של3,זרימת דם4 ו-5,גירוי מכני6 חשובים במיוחד בתהליך ההחלמה של האם. היפוקסיה-induced אנגיוגנזה נושא חמצן, חומרים מזינים, גורמים מסיסים ותאים הדרושים לתיקון רקמות מקומית דרך זרם הדם. גירוי מכני על ידי הרחבת הפעולה גורמת לתגובות ביולוגיות כגון בידול של גזע mesenchymal, היווצרות העצם, הסתיידות, שיפוץ. טיפול דו טורי מאפשרת היווצרות של רקמות קשה אלא גם רקמות רכות, כולל העצבים, שרירים, כלי דם, רקמות העור, ללא צורך השתלת תא גזע. לכן, מודל דו נחשב להיות מודל מצוין עבור ניתוח ולחידוש רקמות שונות.

ארנבים, כלבים הם החיות הנפוצה ביותר במחקר בסיסי לעשות; עם זאת, יש כמה כלי ניתוח זמינים עבור בעלי חיים אלה. השימוש העכבר לעשות מודל מקלה על ניתוח מפורט יותר. . זה מתאים במיוחד עבור ניסויים שימוש בעכברים נוקאאוט. עם זאת, בעת שימוש בעכבר כחיה ניסיוני, ליצור התקן הרחבה. כאן, אנו מציגים עכבר הטיביאלי מודל פותח באמצעות של distractor בהזמנה אישית שנוצרו באמצעות הכלי מעבדת שיניים טכניקה, אשר שימש במחקר הקודם.

Protocol

כל הניסויים בוצעו על פי פרוטוקולים אושרה על ידי חיה אכפת שימוש הוועדה של מוסדנו. לעקר את כל הכלים לפני ההליך. 1. הכנת תבנית ליצירת את Distractor בהזמנה אישית להפוך שתי טבעות לא שלם (הקוטר החיצוני, 20 מ מ; הקוטר הפנימי, 10 מ מ), אשר הם חלק distractor, עם גיליון אחד של פרפין (145 מ”מ x 74 מ”מ) בא?…

Representative Results

דמויות 1A ו- 1B להציג טבעות לא שלם (החיצוני קוטר, 20 מ מ הפנימי קוטר, 10 מ”מ; עובי, 5 מ מ) פרפין. שתי תבניות שעווה הוטבעו בחומר הרושם סיליקון, נוצרה תבנית עבור הטבעות שרף (איור 1C). שרף polymerized נשפך מיד לתוך זה עובש, שרף טבעות התקבלו (<strong class="xf…

Discussion

כאשר חיה גדולה משמשת כמודל ניסויי, ניתן להשתמש בהתקן הרחבה מוכנות מראש, קל להשיג קיבוע טוב ולהעריך את פעולת ההרחבה עצמו ואת הסכום סיומת. עם זאת, כאשר עכבר משמשת כמודל ניסויי, יש צורך לפתח חלק או את כל הציוד. . Isefuku et al. , טיי. ואח הפך המכשיר ויצרו העכבר מודל7,<sup class="xref…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

המחברים מודים גב’ Makiko קאטו על מתן עידוד כדי להשלים את המחקר הזה. אנו מודים גם את הדיוויזיה של חיות ניסוי רפואי מחקר הנדסי, נאגויה בוגר בית הספר לרפואה של אוניברסיטת, על הדיור של עכברים.

Materials

Paraffin wax YAMAHACHI DENTAL MFG. CO. For preparation a mold for resin rings
Labocone putty GC Corporation For preparation a mold for resin rings
Utility wax GC Corporation For preparation a mold for resin rings
Expansion screw Ortho Dentaurum 600-301-30 Component of custom-made distractor
Unifast III GC Corporation Immediate polymerization resin Component of custom-made distractor
Ortho Crystal NISSIN Transparent resin Component of custom-made distractor
25-gauge needle TERUMO NN-2516R For custom-made distractor
27-gauge needle TERUMO NN-2719S For custom-made distractor
ICR mouse Chubu Kagaku Shizai Corporation Experimental animal
Somnopentyl Kyoritsu Seiyaku Pentobarbital sodium salt
Isoflurane FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation 099-06571 Isoflurane inhalation solution

References

  1. Watson, J. T. Distraction osteogenesis. The Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 14, 168-174 (2006).
  2. Ilizarov, G. A. The tension-stress effect on the genesis and growth of tissues: Part II. The influence of the rate and frequency of distraction. Clinical Orthopaedics and Related Research. 239, 263-285 (1989).
  3. Wan, C., et al. Activation of the hypoxia-inducible factor-1 alpha pathway accelerates bone regeneration. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (2), 686-691 (2008).
  4. Fujio, M., et al. Stromal cell-derived factor-1 enhances distraction osteogenesis-mediated skeletal tissue regeneration through the recruitment of endothelial precursors. Bone. 49 (4), 693-700 (2011).
  5. Tong, L., et al. Focal adhesion kinase expression during mandibular distraction osteogenesis: evidence for mechanotransduction. Plastic and reconstructive surgery. 111 (1), 211-222 (2003).
  6. Rhee, S. T., El-Bassiony, L., Buchman, S. R. Extracellular signal- related kinase and bone morphogenetic protein expression during distraction osteogenesis of the mandible: in vivo evidence of mechanotransduction mechanism for differentiation and osteogenesis by mesenchymal precursor cells. Plastic and reconstructive surgery. 117 (7), 2243-2249 (2006).
  7. Isefuku, S., Joyner, C. J., Simpson, A. H. A murine model of distraction osteogenesis. Bone. 27 (5), 661-665 (2000).
  8. Tay, B. K., Le, A. X., Gould, S. E., Helms, J. A. Histochemical and molecular analyses of distraction osteogenesis in a mouse model. Journal of Orthopaedic Research. 16 (5), 636-642 (1998).
  9. Carvalho, R. S., et al. The role of angiogenesis in a murine tibial model of distraction osteogenesis. Bone. 34 (5), 849-861 (2004).
  10. Osawa, Y., et al. Activated FGFR3 promotes bone formation via accelerating endochondral ossification in mouse model of distraction osteogenesis. Bone. 105, 42-49 (2017).

Play Video

Cite This Article
Fujio, M., Osawa, Y., Matsushita, M., Ogisu, K., Tsuchiya, S., Kitoh, H., Hibi, H. A Mouse Distraction Osteogenesis Model. J. Vis. Exp. (141), e57925, doi:10.3791/57925 (2018).

View Video