בדיקות בבעלי חיים חרדה אצל חולדות: ההשפעות של אדני היד פתוחה סגורה זרוע קיר שקיפות מוגבר בתוספת מבחן מבוך
Summary
התנהגות חרדה של חולדות שנבדקו על-ידי גבוהות בנוסף מבוך משתנה מאוד בהתאם סביבת הבדיקות. הנה אנחנו מראים כיצד הגדרות מכשיר, במיוחד במבנה היד, משפיעות על התנהגות על המבוך, ולהסביר לנו פרוטוקול אמין כדי לזהות השפעות הסמים נוגד חרדה. דו ח זה יתרום למחקר חרדה.
Abstract
גבוהות בתוספת מבחן מבוך הוא מבחן התנהגותיות להערכת חרדה בבעלי חיים בחולדות. אף על פי מבחן זה מוחל נרחב בתחום מדעי ההתנהגות, תוצאות סותרות ניתנים לעיתים קרובות בין מעבדות שונות. כדי לזהות את הסיבות תוצאות שונות, בעבר התמקדנו הזרוע תכונות, המשתנות בין מעבדות, רוב ובמיוחד הנוכחות/בהעדר מדפים צדי זרועות פתוחות, השקיפות/opaqueness של היד סגורה קירות. בדוח הקודם, אנחנו להשתמש מיכל מעוצב מותאם אישית כדי להשוות התנהגות חולדה על שילובים שונים של הזרוע פתוחים וסגורים עיצובים בתנאים זהים אחרת ניסיוני, והראה כי הבדלים בתכונות הזרוע להפריע ניסיוני תוצאות. בקצרה, אדני היד פתוחה גדל באופן משמעותי התנהגות חרדה בחולדות, ואילו הזרועות שקוף עשוי גם להיות ירידה התנהגות זו. יתר על כן, נוכל לאמת את רגישות זיהוי גבוהה יותר של השפעת סם נוגד חרדה בשילוב של היד פתוחה לא-ledged + אטום היד סגורה המוקפת חומה בהשוואה עם שילוב של היד פתוחה ledged + שקוף היד סגורה המוקפת חומה. בדו ח זה, אנו מציגים שלנו פרוטוקול גבוהות פלוס מבחן מבוך, יחד עם הדיון תוצאות מפתח הדוח הקודם וניסיון ניסיוני שלנו. אנו מאמינים שבדו ח זה יספק מידע שימושי עבור חוקרים מי המועסקים או מי מתכנן להשתמש גבוהות של פלוס מבוך בלימודיהם.
Introduction
מספר החולים הסובלים הפרעות במצב הרוח, כולל הפרעת חרדה ודיכאון, גוברת. למרות ההתפתחות של הפרעות אלה כרוכה גורמים גנטיים וסביבתיים, המנגנונים פתוגניים מפורט עדיין אינם מובנים במלואם1. לפיכך, המחקר צריך להתמקד לחשוף את המנגנונים המשמשת כבסיס של הפרעות במצב הרוח, כמו גם הפיתוח של תרופות יעילות יש פחות תופעות לוואי.
מבחנים התנהגותיים על חיות מעבדה שימושיים על חקירת תפקוד גבוה יותר המוח, כולל רגש. כמו התנהגות בעלי חיים זה משתנה מאוד, ניסיוני תוצאות קרובות שונות בין מעבדות, אפילו אם זן המפגרים זהה היה בשימוש2. לכן, החוקרים גם צריכים להבין את התכונות הבסיסיות של המכשירים ניסיוני שהם מאמצים על מנת לספק תוצאות אמין, מדויק במעבדה.
גבוהות בתוספת מבחן מבוך הוקמה במקור לבחון תגובתיות רגשית מכרסמים3,4. כל המתקן ממוקם בדרך כלל 500 מ מ מעל הרצפה, מורכב שתיים פקוחות שתי זרועות סגור שהופכים לצורת בתוספת. מדידות של חקר הזרוע (כולל המשך והתדירות של ערכים על כל זרוע), מרחק למולדתי, והתנהגויות שצוין כגון השתתפות שרוע בתנוחה של חיות וכפופים נרשמים בתקופות תצפיתית. על ידי אמצעים אלה, חרדה חיה מוערך כפועל ניסיוני.
גבוהות בתוספת מבחן מבוך משמש ברחבי העולם, אבל לא כל המעבדות להשתמש באותו מכשיר עיצוב5,6, הבדלים אלה עשויים להשפיע על התוצאות ניסיוני. כך למשל, ההבדלים כוללים נוכחות או היעדרות של מדפים לאורך הזרועות פתוח ו/או השימוש של קירות שקופים או אטומים עבור זרועות סגור5,6. מדפי לאורך בזרועות פתוחות, השימוש של קירות שקופים עבור זרועות סגור פותחו כדי למנוע חיות ליפול את המנגנון7, וכדי להקל על תצפיות התנהגותיות בתוך הזרועות סגור, בהתאמה8,9. אמנם היו כמה מחקרים שבדקו הבדלים אינדיבידואליים איך של מבנה היד עשוי להשפיע על היכולת לזהות חרדה בבעלי חיים1,2,5,10,11 , ההשפעות המשולבות של פתח (עם/בלי מדף קצר) ותכונות היד סגורה (קירות שקוף/אטום) על התנהגות בעלי חיים עדיין לא נחקרו.
בדו ח זה התבצעה, דיברנו על ההשפעה של אלה שילובים של הזרוע עיצובים על התנהגות חרדה חולדות12– בקצרה, אדני היד פתוחה גדל באופן משמעותי התנהגות חרדה בחולדות, ואילו הזרועות שקוף עשוי גם להיות ירידה התנהגות זו. יתר על כן, נוכל לאמת רגישות גבוהה יותר לזיהוי של השפעת סם נוגד חרדה בשילוב של היד פתוחה לא-ledged + אטום היד סגורה המוקפת חומה בהשוואה עם שילוב של היד פתוחה ledged + שקוף היד סגורה המוקפת חומה. בדו ח זה, אנחנו להציג את הפרוטוקול שלנו עבור גבוהות פלוס מבוך מבחן, יחד עם הדיון התוצאות מפתח של הדוח הקודם. אנו מאמינים שבדו ח זה יספק מידע שימושי עבור אלה אשר המועסקים או מי מתכנן להשתמש גבוהות של פלוס מבוך בלימודיהם.
Protocol
Representative Results
Discussion
מספר החולים הסובלים הפרעות פסיכיאטריות, כולל הפרעת חרדה, גודלת, חשוב לפתח לימודים חדשנית לשיפור ההבנה של המנגנון הבסיסי של חרדה. כדי להשיג זאת, חשוב גם לייעל את ההליכים ניסיוני. לכן, כדי לשפר את היישום של גבוה בתוספת מבחן מבוך, הראו את השפעת תכונות הזרוע על תוצאות הניסוי באמצעות חולדות.
<p c…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים רוצים להודות מר Akihiro הירנו לסיוע שלו בהפקת המנגנון מותאם אישית. המחברים רוצה להודות קוסוקה מר טקהאשי, מר שינגו נקאג’ימה לסיוע טכני שלהם. עבודה זו נתמכה על ידי מחקר על הסיכון של חומרים כימיים, בריאות, מענקי מחקר מדעי מעבדה, משרד הבריאות, עבודה, רווחה, יפן (H25-KAGAKU-IPPANN-003) גרנט פרוייקט מחקר A על ידי מכון למדע, טכנולוגיה מייג’י אוניברסיטת, יפן.
Materials
| Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| LED lighting | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Elevated plus maze apparatus | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Digital video camera | Watec | WAT-250D2 | Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles. |
| Hard disk recorder | TOSHIBA | RD-R200 | Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera. |
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories Japan, Inc. | NA | Any suitable rats can be used for your study |
| Standard rat cage | Toyoriko | TP-105 | Any suitable rat cage be used for your study |
| Instrument to measure light intensity | AS ONE | 1-5818-02 | Any suitable instrument to measure light intensity |
| EthoVision XT version 8.0 | Noldus | NA | Any suitable software to measure animal behavior |
| Diazepam | Taiyo Pharmaceutical Industry | 1124402A2061 | Any suitable drug can be used for your study |
| Tween 80 | Wako Pure Chemical Industries | 9005-65-6 | Any suitable drug can be used for your study |
References
- Nestler, E. J. Role of the Brain’s Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms. Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).
- Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment. Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).
- Handley, S. L., Mithani, S. Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of ‘fear’-motivated behaviour. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).
- Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat. J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).
- Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze. Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).
- Hogg, S. A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).
- Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze. Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).
- Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze. Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).
- Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls. Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).
- Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam. Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).
- Fernandes, C., File, S. E. The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).
- Horii, Y., Kawaguchi, M. Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats. Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).
- Santos, R. O., et al. Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).
- Lynn, D. A., Brown, G. R. The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood. Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).
- Horii, Y., et al. Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats. Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).
- Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).
- Yang, Y., et al. Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze. Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).
- Albani, S. H., et al. Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age. Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).
