シンプルなフローサイトメトリー法は、全血における単球亜集団のためのグルコース取り込みおよびグルコーストランスポーターの発現を測定するために

単球は、急速に感染し、炎症¹の部位に動員されている人間の自然免疫系の主要な構成要素です。単球の活性化は、病原体による急性の損傷を制限するために重要であり、また、アテローム性動脈硬化症^2、癌^3、およびHIV ^4,5を含むいくつかの慢性疾患の病因の中心です。

休止および活性化単球の代謝は休止単球は、解糖代謝（乳酸へのグルコースの、すなわち 、発酵）を利用した酸化的代謝および活性化単球を利用することで、劇的に異なる^6。単球の活性化は、解糖系代謝⁷増加したグルコース取り込みを可能にするグルコース輸送体の発現を誘導します。単球のグルコーストランスポーター1（GLUT1）は、活性化の間にアップレギュレートさそのような輸送体であり、その発現は、Vにおける前炎症性サイトカインの産生をもたらすことが示されていますITROと肥満マウス⁸の脂肪組織インチカポジ肉腫関連ヘルペスウイルスによって単球細胞株の感染はGLUT1 ⁹の細胞のアップレギュレーションにつながる、と私たちは最近、慢性HIV感染の間にGLUT1を発現する単球の増加割合が未処理と併用抗レトロウイルス療法で処置した感染の¹⁰の間に存在していることを示しました。まとめると、これらの研究は、単球によるグルコース取り込み及び解糖代謝は、多くの炎症性疾患の重要な側面であることを示しています。従って、簡単な方法は、恒常性中単球GLUT1発現およびグルコース取り込みを測定し、炎症性疾患は、研究者の幅広い使用の可能性が高いです。

ヒト単球は、細胞表面マーカーCD14及びCD16 ^11,12の発現差によって調べることができる3つの別個のサブセットで構成され、不均一です。クラシック単球は、CD14の高いレベルを発現するが、CDを発現しません16（CD14 ⁺⁺ CD16 ^{– ）、}中間の単球は、CD14の高レベルおよびCD16（CD14 ⁺⁺ CD16 ^+）の中間レベルを発現し、非古典的単球は、CD14の低レベルとCD16の高レベル（CD14を発現し⁺ CD16 ^++）。 CD16を発現する単球は、CD16に比べCD16 ⁺単球を、と呼ばれる^–単球は、高い炎症性サイトカインの発現とをより効果的に存在する抗原^13,14能力を持っています。単球の約10％は、炎症¹⁵の間に観察されたより高い割合との恒常性の間にCD16を発現します。単球の亜集団は、特定の疾患状態と関連していると、病気や疾患の進行¹⁶の有用な生物学的マーカーである可能性があります。

私たちの目標は、PHYに近い条件でのヒト単球と単球亜集団によるグルコーストランスポーターの発現とグルコースの取り込みを測定することができる方法を同定することでしたできるだけsiological条件。これらの方法は、生理学的条件¹⁹に比べてタンパク質の発現が変化していることができ、単離された単球を検討しても以前の研究では、単球のグルコース輸送体の発現とグルコースの取り込み^17,18を測定し、以前の研究では、ヒト単球亜集団を検討していません。フローサイトメトリーのマルチパラメトリックフローを使用して、我々は全体の未操作の血の中に（CD14およびCD16の発現に基づく）総単球及び単球亜集団によるグルコーストランスポーターの発現と蛍光グルコースアナログ2-NBDGの取り込みを調べるための方法を説明します。